作者：尹晓涛 作者单位：青岛大学医学院附属医院眼科，山东 青岛 266003
【摘要】 目的 建立一种理想的视网膜缺血再灌注动物模型。方法 成年Wistar大鼠20只，除2只4眼作为对照组外，余18只36眼作为实验组,分为缺血1 h组及缺血2 h组，每组9只。实验中用预先制备的线栓插入实验组大鼠颈内动脉，造成视网膜缺血，分别于缺血1、2 h后及再灌注6 h后观察眼底，术后摘除缺血1、2 h及再灌注6 h的眼球进行组织学观察。结果 实验组大鼠术后均发生视网膜缺血，视网膜苍白、水肿，以神经纤维层和内网状层最明显，可见白细胞浸润。再灌注6 h后视网膜水肿减退，神经纤维层水肿减轻，造模成功。结论 此方法比较接近视网膜缺血临床病理过程，模型稳定、可靠。
【关键词】 模型 动物 视网膜 缺血 再灌注 大鼠
ESTABLISHMENT OF RETINAL ISCHEMIAREPERFUSION MODEL WITH THREAD OCCLUSION IN RAT: A PRELIMINARY STUDY
YIN XIAOTAO, MENG RUIHUA, WANG JING
Department of Ophthalmology, The Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College, Qingdao 266003, China
［ABSTRACT］ Objective To establish an ideal retinal ischemiareperfusion animal model. Methods A segment of prepared thread was introduced into the carotid artery of 18 adult Wistar rats and resulted in retinal ischemia of 36 eyes, which was followed by 6 h reperfusion. Fundus changes and morphological changes of eyes were observed after ischemia and reperfusion. According to the period of ischemia, the 36 eyes were divided into two groups: group 1, having 1 h ischemia, group 2, having 2 h ischemia. Four eyes of two rats served as controls. Results The retinal ischemia resulted in retinal pallor and edema with leukocytic infiltrate, especially in nerve fiber layer and plexiform layer. After reperfusion, retinal edema and nerve fiber layer edema began to decrease. Conclusion The retinal ischemia model established in this study is similar to the natural course of clinical retinal ocular ischemia. The model is stable and reliable.
［KEY WORDS］ Models, animal; Retinal; Ischemia; Reperfusion; Rats
视网膜缺血再灌注损伤是眼科常见的病理过程，严重影响病人视功能。其发生机制十分复杂，已成为近年眼科的研究热点之一[1]。动物模型是研究视网膜缺血的重要途径之一。目前较常用的模型有两种：血管结扎模型及升高眼内压模型。理想的视网膜缺血再灌注模型应当是只阻断视网膜动脉或动静脉，而对视网膜其他部分组织没有任何损伤，而由于实验条件和技术的限制，目前尚无一种模型能够达到这一要求[2]。本实验旨在探索建立一种理想的视网膜缺血再灌注动物模型，努力使模型接近临床病理过程,为后续研究奠定基础。
1 材料与方法
1.1 材料
健康成年Wistar大鼠（由青岛市药检所提供）20只40眼，雌雄不限，体质量220～250 g，取2只4眼作为对照组，余18只36眼作为实验组，随机分为缺血1 h和缺血2 h组,每组9只。术中所用器械为：市售普通2.0鱼线（直径0.23 mm），704硅橡胶，砂纸，眼科常用30皮肤缝线，游标卡尺，动脉夹，电凝器。
1.2 方法
1.2.1 线栓制作
①鱼线缠绕一约10 cm×5 cm硬性卡片，重物施压1～2 d，以使鱼线变直；②将鱼线切成4 cm长小段，一端用砂纸打磨约3～4 mm，显微镜下观察表面有凹凸感即可，以方便挂胶；③将打磨好的鱼线蘸少许硅橡胶，立即在光滑的玻璃板上打磨，使橡胶在打磨端呈半透明的圆柱状；④将制备好的线栓自然气温下晾干，游标卡尺量取1.6、1.8 cm长度并标记，挑选直径0.24～0.26 mm线栓压直过夜备用。
1.2.2 模型制作
①水合氯醛（300 mg/kg）腹腔注射麻醉大鼠，25g/L碘附消毒颈部皮肤，颈旁偏左0.3～0.5 cm作长约2 cm纵行切口，钝性分离出颈总动脉、颈外动脉及颈内动脉；②丝线结扎颈外动脉远心端，动脉夹夹闭颈总动脉近心端、颈内动脉远心端，并在颈外动脉靠近颈总动脉处预置一根缝线；③显微剪刀靠近颈外动脉结扎处近心端剪一斜口，插入线栓，打结预置缝线，不必太紧，剪断颈外动脉结扎处，向下逆转动脉，使之与颈内动脉呈一直线；④松开颈总、颈内动脉夹，同时用显微镊子向颈内动脉输送线栓到达标记点即可；⑤此时外观可见大鼠左眼苍白，与右眼对比明显，眼底镜下可见左眼视网膜水肿，苍白，实验组分别缺血1、2 h后恢复再灌注6 h；⑥将线栓头退至颈总动脉分叉处可见左眼巩膜重新恢复血供，视网膜血管充盈，造模成功。
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