张丽 姚克 张一栋 叶盼盼
浙江大学医学院附属第二医院 310009
目的:后发障是现代白内障术后最常见的并发症,后发障的发病机制至今尚未完全明确。上皮间质转分化是后发障发生过程中主的要病理改变,转化生长因子β(TGF-β)作为间质转分化最有力的诱导因子,在后发障发病过程中发挥重要作用。结缔组织生长因子(CTGF)是一种在纤维化过程中起重要作用的间质细胞生长因子,本课题采用siRNA干扰这一高效、特异的基因沉默手段抑制体外培养的人晶状体上皮细胞CTGF的表达,观察基因干扰对TGF-β2诱导的上皮间质转分化的影响,分析TGF-β2和CTGF在晶状体上皮细胞间质转分化过程中的作用及信号转导机制。
方法:采用体外培养的人晶状体上皮细胞株HLE B-3,采用siRNA干扰技术转染细胞沉默CTGF的表达,应用免疫印迹、免疫荧光等方法观察CTGF基因干扰对TGF-β2诱导的晶状体上皮细胞间质转分化相关蛋白的影响。 结果:TGF-β2能够诱导体外培养人晶状体上皮细胞表达CTGF蛋白,CTGF在晶状体上皮细胞内的表达主要位于细胞浆,siRNA干扰能够抑制TGF-β2诱导的人晶状上皮细胞间质转分化相关蛋白的表达。
结论:CTGF作为TGF-β2的下游分子,在TGF-β2诱导的晶状体上皮细胞的间质转分化过程中发挥关键作用。基因干扰CTGF的表达能够抑制TGF-β2诱导的晶状体上皮细胞间质转分化,为后发障的防治提供理论依据。
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