缪爱珠   卢奕

复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科   200031

目的：利用蛋白质组学研方法研究热休克转录因子4b（HSF4b）基因突变(348位核苷酸T突变为C)对人晶状体上皮细胞株SRA01/04的影响。

方法：培养人晶体上皮细胞株SRA01/04，对含人HSF4b基因的质粒进行定点突变，NUucleoBond Xtra Main试剂盒进行质粒抽提，脂质体转染人晶状体上皮细胞(pcDNA3.1-HSF4b，突变的pcDNA3.1-HSF4b，空载体pcDNA3.1)，提取四组细胞总蛋白（经过转染的三组细胞和空白细胞），iTRAQ试剂盒标记蛋白，液相色谱串联质谱鉴定方法定量分析并寻找差异蛋白。

结果：共鉴定出104种蛋白，转染突变pcDNA3.1-HSF4b的细胞分别与其他三组细胞相比，共有20种蛋白发生了上调，14种蛋白发生了下调；以转染空载体组为对照，转染突变HSF4b基因组细胞和转染正常HSF4b组细胞分别有12和14种蛋白的表达量发生改变，其中纽带蛋白均有上调，蛋白S100-A13均有下调。

结论：HSF4b突变(348位核苷酸T突变为C)以后，质粒转染人晶状体上皮细胞，能引起部分细胞蛋白表达量的改变，这些蛋白和热休克反应，细胞分化，蛋白质合成，DNA结合等功能有关。