|
3讨论
CNV的发生是一个极其复杂的病理过程，虽然CNV对感染清除、伤口愈合、抑制角膜溶解等有一定作用[6]，但CNV可破坏角膜正常微环境，使眼前节相关免疫赦免消失[7]，角膜混浊，不但严重影响视力，而且能够显著增加角膜移植片排斥反应的危险性。碱烧伤后CNV的形成需要血管内皮细胞侵入、细胞外基质(extracelluar matrix,ECM)降解、细胞因子活化3个主要过程。在CNV形成中大多认为与角膜损伤后调控CNV形成因子和抑制因子之间的平衡失调有关[8]，而血VEGF起着核心作用[9]。VEGF是内皮细胞特异性促有丝分裂原，对于体内CNV的生成、维持血管的正常状态和完整性具有重要意义。VEGF与内皮细胞表面的特异性受体结合不仅能够促进内皮细胞增殖，增加血管通透性，还能促进其分泌基质金属蛋白酶(matrix metalloroteinases,MMPs)[10]，而MMPs可以降解ECM，促进新生血管形成。碱烧伤CNV模型属于炎症性CNV动物模型，可逼真显示角膜碱烧伤角膜CNV的病理状态，是一种比较理想成熟的制作角膜CNV的方法，实验中完整的反应了角膜CNV的整个病理变化自然过程以及Gen+DMSO溶液的治疗干预后的病理变化过程。免疫组织化学结果表明，与以Gen+DMSO治疗组的角膜CNV密度较DMSO对照组减少相对应，在角膜基质层中VEGF表达较DMSO对照组也减少。
CNV形成与消退是一个十分复杂的过程，角膜伤后3d血管从角膜缘侵入角膜，10～14d为最为旺盛时期。Amano等[11]发现角膜损伤形成CNV后，VEGF mRNA水平及VEGF蛋白水平升高。在动物模型中，角膜基质中植入抗VEGF抗体能够明显抑制VEGF诱导的角膜CNV形成[12]。角膜受伤时VEGF的超常表达使血管内皮细胞分裂、增殖和迁移，并刺激角膜基质细胞分泌细胞外基质，刺激CNV增生[13]。我们发现在角膜碱烧伤后的不同时期内，VEGF含量与宏观观察CNV长度及镜下测量微血管数量多少变化是同步的。并且发现VEGF表达最初始于角巩膜缘，渐由浅角膜基质向整个角膜基质发展，与CNV发生位置相对应。我们认为，VEGF是一种十分重要的CNV形成因子，其表达与CNV形成有密切关系。
金雀异黄素是从大豆中提取的一种异黄酮类化合物，以其明显的生物活性近年来受到普遍关注。Wang等[14]报道，Gen能显著抑制氯化钴模拟缺氧4h后兔视网膜色素上皮细胞VEGF蛋白的表达，且这种抑制作用呈现浓度依赖性;Bertges等[15]报道，Gen可抑制缺氧诱导的HIF1表达及活性引起VEGF基因表达的减少，其作用机制包括：(1)雌激素和抗雌激素作用;(2)拓扑异构酶的抑制作用;(3)增加抗氧化酶活性;(4)抑制络氨酸蛋白激酶活性;(5)抑制CNV形成。目前对Gen抑制缺氧诱导产生的VEGF的机制还不是很明确，推测可能是通过抑制HIF1的表达及活性，同时通过抗氧化作用抑制Ras基因的表达，两者共同作用抑制Ras基因的表达，两者共同作用抑制VEGF的表达而发挥抑制CNV形成作用。本结果表明Gen能明显抑制角膜中VEGF的表达，但未能揭示其具体的发生机制，其可能发生的机制需要我们在今后的工作中进一步研究。
【参考文献】
1 Aiello LP. Vascular endothelial growth factor 20thcentury mechanisma, 21stcentury therapies. Invest Ophthalmol Vis Sci 1997;38(9):16471652
2 Dixon RA, Ferreira D. Genistein. Phytochemistry 2002;60(3):205211
3 Karam setty MR, Klinger JR, Hill NS. Phytoestrogens restore nitric oxidemediated relaxation in isolated pulmonary arteries from chronically hypoxic rats. J Pharmacol Exp Ther 2001;297(3):968974
4余增丽,韩萍,李文杰.染料木黄酮对骨形成的促进作用研究.营养学报 2005;27(1):3437
5 Wang B, Zou Y, Li H, et al. Genistein inhibited retinal neovascularization and expression of vascular endothelial growth factor and hypoxia inducible factor 1a in a mouse model of oxygeninduced retinopathy. J
Ocular Pharmacol Ther 2005;21(2):107113
6 Streilein JW, Bradley D, Sano Y, et al. Immunosuppressive properties of tissues obtained form eyes with experimentally manipulated corneas. Invest Ophthalmol Vis Sci1996;37(2):413424
7 Dana MR, Streilein JW. Loss and restoration of immune privilege in eyes with corneal neovascularization. Invest Ophthalmol Vis Sci 1996;37(12)：24852494
8金惠铭，李先涛.血管新生的调控.中国微循环 2001;5(2)：8588
9 Naldini A, Pucci A, Bemini C, et al. Regulation of angiogenesis by Th2 and Th2type cytokines. Curr Pharm Des 2003;9(7)：511519
10唐维强，柳林.基质金属蛋白酶与角膜病变.国际眼科杂志2004;4(1):120124
11 Amano S, Rohan R, Kuroki R, et al. Requirement for vascular endothelial growth factor in wound and inflammation related corneal neovascularization. Invest Ophthalmol Vis Sci1998;39(1):1822
12 Binetruytournaire R, Demangel C, Malavaud B, et al. Identitication of a peptide blocking vascular endothelial growth factor(VEGF) mediated angiogenesis. EMBOJ2000;19(7):15251533
13 Adinolfi M, Akle CA, McColl I, et al. Expression of HLA antigens,β2microglobulin and enzymes by human amniotic epithelial cells. Nature 1982;295(5847):325327
14 Wang B, Zou Y, Yuan ZL, et al. Genistein suppressed upregulation of vascular endothelial growth factor expression by cobalt chloride and hypoxia in rabbit retinal pigment epithelium cells. J Ocular Pharmacol Ther 2003;19(5):457464
15 Bertges DJ, Berg S, Fink MP, et al. Regulation of hypoxiainducibale factor 1 in enterocytic cells. J Surg Res2002;106(1):157165 上一页 [1] [2] |
