外伤整形及眼眶 1590 PO0795
甲状腺相关眼病患者眼眶前脂肪细胞的培养、鉴定及分化
王莉菲 吴中耀 杨华胜 颜建华
广州中山眼科中心 510060
[目的]：验证眼眶脂肪组织中前脂肪细胞的存在及探讨其在甲状腺相关眼病（TAO）发生、发展中的作用。
[方法]：选用TAO患者和正常对照眼眶中的脂肪颗粒及纤维组织，采用组织块培养法培养目的细胞及成纤维细胞；前脂肪细胞因子-1（Pref-1）免疫组织化学染色初步鉴定前脂肪细胞的存在；诱导细胞向成熟脂肪细胞分化，油红O提取法测量每天细胞内脂肪含量的变化，共聚焦显微镜、扫描电镜及油红O染色倒置显微镜观察分化细胞内脂肪滴的存在；流式细胞技术检测前脂肪细胞分化率。
[结果]：1、所培养的目的细胞为梭形，增值旺盛，与眼眶成纤维细胞倍增时间相似。2、Pref-1免疫组织化学染色显示脂肪来源的目的细胞呈阳性反应，而纤维组织来源的成纤维细胞仅个别呈弱阳性反应，初步鉴定前者为前脂肪细胞；3、前脂肪细胞在分化过程中细胞内脂肪含量随分化天数的增加而增加，12天左右达到高峰，而成纤维细胞未见明显脂肪含量的增加；4、前脂肪细胞可定向分化为成熟脂肪细胞，分化末期胞浆内可见明显脂肪滴。成纤维细胞未见明显形态学改变；5、流式细胞技术检测显示，TAO眼眶中前脂肪细胞的分化率为12.3%，成纤维细胞转化为脂肪细胞的阳性率仅为1.3%。
[结论]TAO患者眼眶组织中存在着功能活跃的前脂肪细胞，进一步验证了脂肪细胞数量的增加在TAO发病中的重要作用。
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