作者:王锦, 刘翠青,宋书群
摘要:目的体外观察研究中药鱼腥草乙醚提取物抗角膜真菌作用。方法采用体外药敏试验方法。结果鱼腥草乙醚提取物对串珠镰孢菌、茄病镰孢菌和黄曲霉菌 3 种角膜真菌的抗菌活性不同。结论鱼腥草乙醚提取物对茄病镰孢菌的抗菌效果最好。
关键词:鱼腥草乙醚提取物; 角膜真菌; 抗菌活性
中药鱼腥草乙醚提取物有一定的抗真菌作用。该项研究利用鱼腥草乙醚提取物对华北地区导致真菌性角膜炎的常见菌株:串珠镰孢菌、茄病镰孢菌和黄曲霉菌[1]的抗菌活性进行研究。现将研究结果报道如下。 1材料与方法
1.1 材料
1.1.1 中药鱼腥草购自河北省石家庄市乐仁堂总店。
1.1.2 菌种串珠镰孢菌(Fusarium monilifome)、茄病镰孢菌 (Fusarium solani)和黄曲霉菌 (Aspergilus flavus)各一株,均由河北医科大学王刚生教授惠赠。
1.2 方法
1.2.1 药物的制备取研成粉末状的中药鱼腥草 10 g,过 20 目筛,用 10 倍量的乙醚浸泡 48 h,抽滤后将上清液挥干,得中药鱼腥草乙醚浸膏,用丙酮溶解备用。
1.2.2 药基的制备马铃薯培养基和察氏培养基经高压蒸气灭菌并冷却至 40~50 ℃ 时,无菌操作加入中药丙酮溶解液,使其药物浓度为 10 mg/ml,然后做倍比稀释,使其最终药物浓度为 5,2.5,1.25,0.625,0.312 5 mg/ml,并以含 20%丙酮溶解液的药基做空白对照。
1.2.3 菌液的制备将串珠镰孢菌、茄病镰孢菌接种于马铃薯培养基,黄曲霉菌接种于察氏培养基,置于 28 ℃ 温箱孵育 2 周后,用手术刀刮取菌丝体,于组织研磨器内加入无菌生理盐水研磨成菌丝长度为 10~50 μm的菌悬液,离心 (4 000 r/min,5min),弃上清,取沉淀菌丝加入培养基,血细胞计数板计数。菌丝浓度最终均调为:(0.32~0.37)×107 cfu/ml。
1.2.4 抑菌实验用微量移液器取 3 种实验菌液,点种于鱼腥草药基底部,每管0.5μl。将药基直立放于 28 ℃ 温箱内孵育 2 周,观察各管真菌生长情况。以下列标准计录[2]:菌完全无生长为“-”,菌发育迟缓,形成较小菌落为“+”,菌发育不旺盛为“+ +”,菌发育较旺盛为“+ + +”,菌发育迅速、旺盛为“+ + + +”。
2 结果
中药鱼腥草对 3 种实验菌株的抗菌活性不同,其中对茄病镰孢菌的抗菌效果最好,对串珠镰孢菌的抗菌效果次之,对黄曲霉菌效果最差。见表 1 。表1 中药鱼腥草对 3 种试验菌株的抗菌作用(略)
3 讨论
临床上,真菌性角膜炎的发病率越来越高,但目前用于临床的抗真菌药物种类少,并且对机体的毒副作用较大,使真菌性疾病,尤其是真菌性角膜炎不能得到很好的治疗。因此,由天然中草药中寻找低毒并且抗真菌效果好的药物已成为医务工作者的当务之急。
实验选用体外药基法对中药鱼腥草乙醚提取物抗串珠镰孢菌、茄病镰孢菌和黄曲霉菌进行研究,研究结果显示鱼腥草乙醚提取物对茄病镰孢菌的抗菌效果最好。
参考文献:
[1]王丽娅,张月琴,王印其,等.中国三地区真菌性角膜病菌种的调查[J].中华眼科杂志,2000,36(2):138
[2]宫毓静,安汝国,虞 慧,等.164 种中药乙醇提取物抗真菌作用研究[J].中草药,2002,33(1):42.
作者简介:王 锦(1965),女(汉族),河北邢台人,现任邢台医学高等专科学校高级讲师,学士学位,主要从事中草药开发及病原生物教学与研究工作.
(邢台医学高等专科学校,河北 邢台 054000) |