刘小勇 陈剑 周清 徐锦堂
广州暨南大学附属第一医院眼科 510630
目的:探讨表层角膜基质诱导羊膜上皮细胞转分化为角膜上皮细胞的可能性。
方法:取足月产人羊膜,通过酶消化法获得羊膜上皮细胞,将细胞培养扩增、传代。将2~3代羊膜上皮细胞,接种于表层角膜基质上培养,待羊膜上皮细胞融合形成单层后,进行气液界面培养14天。对构建的组织工程角膜进行苏木素-伊红(HE)染色进行形态学观察、扫描电镜及透射电镜进行超微结构观察,以及角蛋白CK12的免疫组织化学检测。
结果:人羊膜上皮细胞可在角膜基质上生长,培养1~2天可形成单层,气液界面培养14天可形成4~5层细胞的复层上皮,免疫组化检测复层细胞表达角蛋白CK12,所形成的复层上皮与正常角膜上皮相似。
结论:表层角膜基质可诱导羊膜上皮细胞向角膜上皮细胞转分化,羊膜上皮细胞有可能作为种子细胞用于组织工程角膜上皮重建。
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