刘先宁   吴洁   朱秀萍

陕西省眼科研究所   西安市第一医院   710002

目的:建立兔角膜上皮干细胞缺失动物模型，为人工生物角膜上皮实验研究奠定基础。

方法:方法一，单纯去除角膜缘浅板层环周内外宽各2mm.深约100-150Um角膜组织；方法二，在方法一的基础上，再去除角膜中央浅板层组织约100-150Um。术后，裂隙灯显微镜下观察，以角膜混浊、上皮荧光素染色及新生血管为参数评价，3项参数得分之和为该动物时间点总评分。以角膜新生血管评分在3分以上，角膜上皮混浊在2分以上，采用印迹细胞法角膜面取材行角蛋白K3 单克隆抗体间接免疫荧光法检测表达为阴性的。

结果：单纯去除角膜缘的动物模型10只眼有4只眼成功（40%），从制作至成功平均时间29.5±1.3天。角膜缘联合角膜中央板层组织共同去除组，10只眼均成功（100%），从制作至成功平均时间为15.8±0.8天，两组成功率对比差异有统计学意义(X2=8.58，P<0.01)；成功天数比较差异有统计学意义(t=24.5>t(12)0.001，P<0.001)。两组成功模型角膜采用印迹细胞法材行角蛋白K3 单克隆抗体间接免疫荧光法检测表达均为阴性。

结论：采用角膜缘联合角膜中央上皮共同去除法制备角膜上皮干细胞缺乏模型成功率高，周期短，值得推广应用。