银勇   朱秀萍   吴洁

陕西省眼科研究所   西安市第一医院   710002

目的：采用国产程序降温仪，建立一种费用低廉、质量可靠、适合我国国情的液氮深低温长期保存角膜的方法。

方法：以含量20%的人血白蛋白92.5%、二甲基亚砜7.5%，制备抗冻剂。采用国产RBL-PA型程序降温仪对角膜进行液氮深低温法长期保存：正常人角膜置于4℃预冷的抗冻剂中30分钟后，先以0.5℃/min速率降至-10℃，再以3℃/min降至-30℃，最后以8℃/min降至-80℃，将角膜容器直接浸泡于液氮中（-196℃），保存1~6月。1~6月后，将角膜容器迅速置于37℃水浴中复苏，然后采用锥兰—茜素红染色法检测内皮细胞存活率；和采用EM-1020角膜内皮显微镜眼库镜头观察内皮细胞密度和形态。

结果：与正常角膜植片相比，采用该液氮深低温法保存1-6个月的角膜植片在内皮细胞存活率、密度和形态等方面均无统计学差异。

结论：应用国产RBL-PA型程序降温仪(北京)进行液氮深低温法长期保存角膜可取得良好的效果，且费用低廉，可在眼库中推广使用。