周雪美 原慧萍 周欣荣 孙大为 王雅
哈尔滨医科大学附属第二医院眼科 150086
目的:探讨胎鼠脑室管膜下区神经干细胞(Neural Stem Cells,NSCs)联合雪旺氏细胞(Schwann Cells,SCs)视网膜下腔移植后,神经干细胞在正常SD大鼠眼内的迁移和分化情况。
方法:机械分离14.5天的SD胎鼠脑室管膜下区细胞,利用有限稀释法纯化NSCs。通过免疫细胞化学法鉴定胎鼠NSCs及分化细胞的类型。GFP标记NSCs和雪旺氏细胞后进行正常SD大鼠视网膜下腔移植,正常SD大鼠视网膜下腔细胞移植,分三组:单独NSCs移植组;NSCs联合雪旺氏细胞移植组;PBS移植组。采用多波长半导体激光视网膜脉络膜联合同步造影机(Heidelberg retina angiograph,HRA)、视网膜光学相干断层扫描仪(Optical coherence tomography,OCT)和免疫组织化学法检测移植的NSCs在视网膜内的存活、迁移和分化情况。
结果:有限稀释法能够纯化胎鼠脑室管膜下区NSCs,并且纯化的NSCs能向神经元和神经胶质细胞方向分化。HRA和OCT结果证实被标记了GFP的移植的NSCs能在宿主视网膜内存活良好,同时免疫组织化学法证实移植的NSCs能在视网膜内迁移并分化成神经元和神经胶质细胞。移植后3个月,联合雪旺氏细胞移植组的NSCs分化成神经元的数量最多。
结论:有限稀释法能有效地纯化体外培养的胎鼠脑室管膜下区NSCs。移植的NSCs能在视网膜内迁移和分化成神经细胞,雪旺氏细胞加强了这种作用。我们的研究为深入探讨青光眼病理机制-细胞移植治疗等提供依据和有价值的参考。 |