王丁丁 于强 柳夏林

　　中山大学中山眼科中心 510060

　　目的：观察正常及缺氧条件下NGF对体外培养的人视网膜血管内皮细胞(HRCEC)增殖的影响。

　　方法：原代培养HRCEC，取第3代细胞进行实验：1)加入干预培养液(正常和缺氧条件)后第3天进行MTT检测;2)细胞接种于Matrigel，添加培养液，培养12h后摄像，分析比较小管面积。

　　结果：1.不同因子对正常或缺氧条件下细胞培养结果相同：1)随NGF浓度增加细胞数目明显增多;2)NGF+K252a组较同浓度NGF组细胞数目减少，随K252a浓度增加细胞数目减少趋势显著;3)bFGF组与阴性对照组比较细胞数目明显增多，细胞数目明显多于NGF20ng/ml及NGF50ng/ml组，稍多于NGF100ng/ml组;4)bFGF+K252a组与bFGF组比较细胞数目无明显区别。2.Matrigel中毛细血管形成实验表明：1)在正常培养液HRCEC形成不完全的、松散的管状结构;2)NGF、bFGF组HRCEC形成完整的管状结构，小管面积均明显大于正常培养液组，NGF组小管面积小于bFGF组;3)NGF+K252a组小管结构完整性被打破，小管面积小于NGF组;4)bFGF+K252a组小管结构、面积与bFGF组比较无明显改变。

　　结论：1.NGF促进HRCEC的增殖，该作用可被特异性TrkA阻断剂K252a所阻断，二者作用呈浓度依赖性。2.NGF可在体外促进视网膜新生毛细血管管腔的形成，该作用可被K252a所阻断。3.NGF促进HRCEC增殖和血管管腔形成的作用弱于bFGF，K252a无法阻断bFGF的作用。