2 　结果

　　2.1 680 nm激光对PVEP的影响 正常豚鼠在清醒状态下，植入电极引导出来的波形为NPN形，与人类的PVEP诱发图形相似[1]。图形起始为一深大的负波，随后为一较大正波，后为负波后电位。经过680 nm激光照射后，PVEP波的潜伏期后移并且振幅明显减小(见图1)。激光作用后在不同空间频率下变化特点是不一样的。

　　2.1.1 潜伏期 在空间频率为0.1 cpd时，对照组P1波的潜伏期为(90.36±1.61)ms，实验组为(98.89±3.62)ms;0.3 cpd时，对照组为(94.07±2.36)ms，实验组为(99.46±3.18)ms，对照组和实验组潜伏期差异有统计学意义(t=23.00，P=0.001;t=9.26，P=0.016)。随着空间频率的增加，对照组和实验组潜伏期逐渐接近，在其余空间频率，对照组和实验组潜伏期差异没有统计学意义(P>0.05)(见图2)。

　　2.1.2 振幅 对照组和实验组的振幅随着空间频率的增加都降低，激光作用后，实验组振幅明显降低(见表1)。空间频率在小于0.5 cpd时，对照组和实验组振幅差异没有统计学意义(P>0.05);而当空间频率大于0.5 cpd时(包括0.5 cpd)，振幅差异有统计学意义(P<0.05)(见表1、图3)。

　　2.2 680 nm激光对豚鼠空间分辨能力的影响 本实验初步观察了激光能量的大小对豚鼠的空间分辨能力的影响。由于空间分辨能力可以用视力来量化[3]，所以我们以视力来表示。当空间频率减小至某一方格无可辨认的P1波出现时，其上一级方格即为能诱发出VEP的最小方格，即豚鼠的视力，用cpd来表示，取其均值作图。随着激光能量的增加，豚鼠的视力逐渐下降，尤其是激光能量大于0.6 mW时，豚鼠的视力几乎呈直线降低(见图4)。

　　3 讨论

　　图形视觉诱发电位反映了视觉信息从视网膜到大脑皮质视觉中枢信号的传递过程[4]，主要反映神经节细胞的功能。由于无创性和客观性，PVEP检查在临床上有着广泛的用处。豚鼠与人类有着较为相似的视椎、视杆细胞比例[5-6]，内核层、内网状层和光感受器细胞层的厚度与人类比较接近，提示豚鼠具有比较好的视力。激光具有的高亮度、高相干性的特点，使得其光能量在时间与空间上高度集中，其对生物体损伤反应受多方面因素影响，诸如功率、波长、照射时间和光斑等。

　　本实验中，由于激光的作用，PVEP潜伏期和振幅的变化比较明显。分析其原因可能有以下几个方面：?譹?訛可能是激光使感光细胞的视紫红质发生分解，产生感受器电位，通过一系列的信号传递到达神经节细胞，经过总和，引起神经节细胞的去极化，从而产生光感，但此时图形刺激达不到引起神经节细胞去极化的阈电位[7]，因此只能引起模糊的视觉形象(即光感受清晰，图形感受模糊)，从而表现为PVEP潜伏期的延长和振幅的降低。?譺?訛PVEP的变化可能与眼球的结构损伤有关。有研究表明，波长400～900 nm的激光束投射到角膜上，经角膜和晶状体聚焦，使视网膜在单位面积上所受激光照射的能量比相应的角膜入射量提高了近105倍[8]。虽然本实验激光能量很小，刺激时间短，但仍不排除激光聚焦后对视网膜的损伤，尤其是神经节细胞的损伤，从而造成PVEP的P1波潜伏期的延长和P1波振幅的下降。透明角膜主要吸收波长短于295 nm的紫外线及长于1900 nm的远红外线[9]，但当680 nm激光能量较高时，激光光能经含黑色素较多的豚鼠眼虹膜吸收后转化为热能，对邻近角膜内皮可能造成热损伤，从而造成豚鼠对图形的识别障碍，影响PVEP波形。因此激光能量应控制在一定范围内，避免对角膜内皮造成损伤[10-11]。680 nm激光属于可见光激光的范围，视网膜色素上皮层对此范围的激光有很强的吸收率，大约50%，而近红外激光只有8%~10%的吸收率[12]。因此，进入瞳孔的激光大部分被视网膜色素上皮层所吸收，温度上升，并向神经感觉层和周围传导，从而引起光感受器细胞的损伤。本实验虽然延长激光对豚鼠的刺激间隔时间(10 min)，但仍不能排除激光光能的累积效应对豚鼠视觉系统造成的损害。?譻?訛PVEP的改变与激光造成的失能眩光(disability glare)有关。680 nm激光属于微脉冲半导体激光，它是一种短促的阈值( 低于热损伤阈值 )下能量激光。微脉冲半导体激光已经被证实，在曝光时间不超过l00 s的情况下，微脉冲激光只对色素上皮细胞起作用，因为在极短的时间内，热量流动或从原照射区的热传递作用，对光感受器或脉络膜毛细血管的影响很少[13-14]。而且何晓静等[14]报道，微脉冲810 nm激光能量在阈下光凝作用于兔眼视网膜，组织学及电镜下观察仅见色素上皮细胞内轻微的内质网扩张，而神经节细胞、内核层、外核层变化不明显，光感受器细胞未见损害。由此推断，本实验条件下的680 nm激光影响PVEP的机制可能并不是通过损伤作用而实现的，而可能是通过眩光作用实现。眩光是一种视觉状态，它是由于视野内光照的亮度分布不恰当或亮度过强而引起的不舒适或视觉功能降低的现象，为不舒适眩光(discomfort glare)和失能眩光(disability glare)。不舒适眩光是一种心理现象，而眩光造成视功能降低，则称为失能眩光，失能眩光是由于视野中的强光降低了目标的对比敏感度和可见度，从而影响了视觉作业的效绩[15]。由于激光具有高亮度、高相干性的特点，致使豚鼠失能性眩光，从而导致对图形辨别能力的下降，进而影响PVEP。综上所述，本实验条件下，激光对豚鼠PVEP的影响可能是通过以上三方面的作用实现的。

　　梅军等[16]对不同视力患者进行PVEP检查，发现P100振幅明显降低(P<0.01)，潜伏期无明显变化(P>0.05)，进行相关分析后发现视力与振幅呈正相关(r=0.588)，他们认为振幅是反应视力主要指标。本实验结果发现，随着空间频率的增加，P1的振幅明显降低。与对照组比较，实验组刚开始变化并不是很明显，这可能是，在同一种功率激光的照射下，豚鼠视网膜对低空间频率的图形还能辨认，但是随着空间频率的增高，对图形的分辨率迅速降低，尤其是当空间频率大于0.5 cpd时，豚鼠已经失去对图形的辨认能力，所以振幅明显降低。但是实验组与对照组的潜伏期随着空间频率的增加差别并不是很明显，原因不明确，还有待研究。

　　在动物视觉功能(视力的评价)的研究上，其研究方法还是比较单一，主要采用行为学的研究方法，这种研究方法不仅时间长，而且变异性比较大，结果不是很统一。比如：Over等[17]报道，6～24 d的鸡的视力，最低值为1.5 cpd;Demello等[18]报道为4～6 cpd。以各种迷宫为基础的行为学研究方法多用于大、小鼠视力的研究。Gianfranceschi等[19]报道转基因小鼠行为学测量视力为0.5～0.6 cpd，Prusky等[20]报道小鼠的视力超过0.5 cpd。另外，行为学方法需要对实验动物进行训练，操作费时，带有一定的主观性，因此探索一种操作方便的、客观的研究方法来解决以上问题是十分有意义的。PVEP与动物的形觉功能密切相关，但是常用的实验动物如大鼠、小鼠难以记录到PVEP，而豚鼠和人眼在组织学以及生理学上有高度的一致性[5]，是一个较好的视觉研究的模型动物[21]。因此，本研究采用PVEP来检测激光对豚鼠视力的影响，虽然其在衡量动物视力的准确性上还有待完善，但是本实验为PVEP检测动物视力的研究提供了一种新方法，用其来研究动物的形觉功能有着重要的意义。

　　总之，本实验初步探讨了680 nm激光对豚鼠PVEP的影响，为进一步研究激光对视觉功能的影响以及PVEP在动物视力的评价提供了实验依据和方法。

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