目的 通过旋转型角膜上皮瓣下微型角膜刀法准分子激光磨镶术(Epi-LASIK)与乙醇浸泡法激光磨镶术(LASEK)的实施,观察其临床结果以及相关的基础研究。
方法 观察42例72眼旋转型Epi-LASIK手术的一年随访临床结果,主要观察近视矫正能力和视觉质量。观察LASEK术后角膜知觉的恢复情况及其与切削深度的关系。采用兔眼做实验,比较Epi-LASIK与LASEK对角膜基质细胞凋亡及α-SAM的影响。
结果 1)术前平均近视屈光度为-9.13±4.23D(-1.25D~-19.00D)。术后一年,83.3%眼屈光度在±1.00D之内。1.8%眼出现0.5级Haze,无一眼最佳矫正视力比术前下降,16.7%眼术后矫正视力高于术前。<-10.00D的近视眼,术后1月对比敏感度下降,但一年后全部恢复。术后一年,仍见到Epi-LASIK手术病人高阶像差增加。
2)LASEK病人,术后1月角膜知觉开始恢复,低中度3个月完全恢复,高度近视6个月完全恢复,切削深度越深,恢复时间越长。
3)Epi-LASIK角膜基质细胞凋亡比LASEK少,α-SAM蛋白比LASEK少。
结论 角膜上皮瓣下准分子激光磨镶术是一种安全可靠、疗效较好的手术,角膜知觉恢复快。基础研究支持Epi-LASIK比LASEK产生Haze少而轻。
Clinical outcomes and prelimetary laboratory study of laser epithelial keratomileusis
Objective To compare the clinical outcomes and laboratory study of 1aser-assisted subepithelial keratomileusis ( LASEK) and epipolis laser in situ keratomileusis(Epi-LASIK).
Methods 72 eyes of 42 patients underwent Epi-LASIK were followed in 1 year with refractive correction and visual quality. The relation between the recovery of corneal sensation and corneal ablation depth were evaluated. The influences of Epi-LASIK and LASEK on the apoptosis of rabbit keratocyte were compared.
Results 1) The mean preoperative spherical equivalent was -9.13±4.23D(-1.25D~-19.00D). 83.3% of the postoperative spherical equivalent was within ±1.00D in 1 year. Haze of level 0.5 occurred in 1.8% of the eyes. BCVA improved in 16.7% of the eyes and decreased in no eye. Contrast sensitivity decreased in 1 month in eyes with SE<-10.00D and recovered fully in 1 year. Some patients with Epi-LASIK still have increased higher-order aberration in 1 year. 2) For the patients with LASEK, corneal sensation began to recover in 1 month. Corneal sensation fully recovered in 3 months for patients with mild to moderate myopia and in 6 months for patients with severe myopia. Recovery time was longer for patients with deeper corneal ablation. 3) Compared with patients with LASEK, patients with Epi-LASIK had less keratocyte apoptosis and α-SAM protein.
Conclusions Epipolis laser in situ keratomileusis is a kind of safe and effective refractive surgery with faster corneal sensation recovery. The laboratory study suggest that Epi-LASIK might cause less haze than LASEK.
近年来,由于微型角膜刀制作带基质的角膜瓣引起的诸多问题逐渐被认识,准分子激光手术领域出现了向角膜表层切削回顾的趋势,角膜上皮瓣下准分子激光磨镶术受到了广泛关注,它包括乙醇浸润法准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术(laser-assisted subepithelial keratectomy,LASEK)与微型角膜刀法准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术(epipolis laser in situ keratomileusis,Epi-LASIK)。本文报道了我院近年来LASEK与Epi-LASIK矫正近视的临床疗效以及相关的基础研究结果。
资料与方法
一、Epi-LASIK的临床疗效观察
42例 (72眼)近视患者,其中男性22例,女性20例,平均年龄28.4±8.3岁(19~50岁)。术前平均球镜度数(SE)-9.13 ± 4.23D (-1.25D~ -19D)。根据术前SE,分为三组: A组21眼,SE<-6D(平均SE=–3.35±1.68D);B组22眼,-6D ≤ SE < -10D(平均SE=–7.95±1.33D);C组29眼,SE ≥ -10D(平均SE=–13.51±2.83D)。术前检查项目包括:裸眼视力(UCVA)、裂隙灯检查、综合验光仪验光、眼压、角膜地形图、中央角膜厚度、对比敏感度、像差、散瞳查眼底等,均排除了眼部其他病变。对比敏感度采用对比敏感度-眩光测试仪CGT-1000 (Takagi Seiko公司,日本)进行测量。像差采用WFA-1000 主观像差测量仪(苏州六六视觉),在暗室、自然瞳孔(>5mm)下进行测量。
手术采用自动旋转型角膜上皮刀(KM-5000D,无锡康宁医疗器械公司)制作蒂部位于上方的上皮瓣。激光切削采用Zeiss Mel-80准分子激光仪。激光切削完毕后,用平衡盐溶液冲洗基质床并使上皮瓣复位,表面覆盖软性角膜接触镜。术后局部应用0.3%氧氟沙星滴眼液,每天3次,持续2周;0.1%氟米龙滴眼液每天4次起,每2周递减1次,持续8周。角膜接触镜在术后3~5天时取出。术后随访内容包括:视力、屈光度、haze、对比敏感度、像差等,随访时间均大于1年。采用配对t检验方法比较手术前后对比敏感度及像差。
二、LASEK术后角膜知觉的恢复
50例 (85眼)近视患者,男女各25例。根据术前SE,分为两组:低中度近视组22例,SE<-6D(平均SE=–3.68±1.56D);高度近视组28例,SE>-6D(平均SE=–10.70±3.81D)。术前除常规准分子激光手术检查项目以外,还采用Cochet&Bonnet触觉测试仪(Luneau, Ophthalmologia,法国)测量角膜中央知觉。
制作上皮瓣方法:20%乙醇浸泡10~20s,采用上皮分离器制作蒂部位于上方的上皮瓣。激光切削采用Zeiss Mel-80准分子激光仪。其余处理与Epi-LASIK相同。随访:由同一位医生在术后2周、1月、3月与6月时测量角膜中央知觉。采用配对t检验方法比较手术前后角膜知觉,采用Spearman两因素相关分析角膜知觉和切削深度的相关性。
三、比较Epi-LASIK与LASEK对角膜基质细胞的影响
50只新西兰大白兔为实验对象。随机编号,其中48只(96眼)随机一眼行Epi-LASIK术,另眼行LASEK术,余2只(4眼)未手术眼作为正常对照组。术前用裂隙灯显微镜检查排除眼前段炎症病变及角膜混浊。
手术方法:戊巴比妥钠耳缘静脉麻醉和0.4%盐酸奥布卡因表面麻醉。双眼分别用微型角膜刀法和乙醇浸润法(20%乙醇浸润35秒)制作角膜上皮瓣,采用Mel-80准分子激光治疗仪,以瞳孔中心为中心,切削区直径为6mm,均按-6.00D切削。复瓣后覆盖-0.50D软性角膜接触镜,术后三天摘镜。
在术后4小时、24小时、72小时、1周、1月与3月共6个时间点取角膜,TUNEL法检测角膜基质凋亡细胞,免疫组化染色检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Western blot法测定α-SMA定量。对角膜基质TUNEL阳性细胞数、α-SMA阳性细胞进行计数,在每个时间点高倍镜下随机观察10个视野,分别记录阳性细胞数,计算平均值与标准差,用完全随机设计单因素方差分析和两组完全随机化设计资料均数的t检验进行统计学处理。
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