眼科研究 2000年第3期第18卷 实验研究

作者：周红颜　杨培增　黄祥坤　陈玲　钟晖　金浩丽　籍莉　陆惠玲　陈盛强

单位：周红颜　杨培增　黄祥坤　陈玲　钟晖　金浩丽（510060广州，中山医科大学中山眼科中心）；籍莉（广州白云区人民医院）；陆惠玲（中山医科大学法医物证教研室）；陈盛强（广州医学院）

关键词：前葡萄膜炎；免疫遗传；HLA-B27抗原

　　摘要　目的 探讨HLA-B27抗原与前葡萄膜炎的相关性及可能的意义。方法 用多聚酶链反应(PCR)和微量淋巴细胞毒试验对20例伴有关节强直性脊椎炎(AS)的急性前葡萄膜炎(AAU)、67例AAU、70例慢性前葡萄膜炎和708个健康人进行HLA-B27分型。结果 AS伴有AAU和单纯的AAU患者中HLA-B27阳性率分别为70%和49.25%，显著高于对照组(2.97%，P＜0.001），慢性前葡萄膜炎患者中HLA-B27的阳性率(4.28%)与对照组无显著差别。结论 AAU与HLA-B27有密切的相关性，在这些患者中进行HLA-B27分型对评价葡萄膜炎的病因和预后有一定的价值。

　　分类号 R773

The association of various forms of anterior uveitis with HLA-B27 antigen and its clinical implication

Zhou Hongyan，Yang Peizeng，Huang Xiangkun

　　（Zhongshan Ophthalmic Center，Sun Yat-sen University

　　of Medical Sciences，Guangzhou　510060）

　　Abstract　Objective：To investigate the association of various forms of anterior uveitis with HLA-B27 antigen and its possible clinical implication．Methods：Polymerase chain reaction （PCR） or microcytotoxity assay was used for determinating HLA-B27 on 20 patients with ankylosing spondylitis（AS） and acute anterior uveitis（AAU），67 patients with AAU，70 patients with chronic anterior uveits including idiopathic anterior uveitis and Fuchs syndrome，and 708 healthy individuals．Results：Determination of HLA-B27 in 51 samples with both PCR and microcytotoxity assay revealed the same result，indicating that data from each method may be compared．A strong association between HLA-B27 and AS and AAU （70％），and with AAU （49．25％） was noted compared with the controls (2．97％， P＜0.001）．No positive association was found between HLA-B27 and chronic anterior uveitis．Conclusion：AAU，especially in company with AS，is strongly associated with HLA-B27 antigen．Determinating HLA-B27 is helpful in the investigation of the etiology，and evaluation of prognosis of AAU．

　　Key words　anterior uveitis　immunogenetics　HLA-B27antigen

　　葡萄膜炎是一类常见的致盲眼病。近年来，免疫遗传方面的研究已揭示出多种类型葡萄膜炎与特定的人类白细胞抗原（human　leukocyte　antigen，HLA）相关^［1］，如HLA-B27与急性前葡萄膜炎（acute　anterior　uveitis，AAU）有密切的相关性^［2-6］，但有关HLA-B27与其它类型的前葡萄膜炎以及与关节强直性脊椎炎（ankylosing　spondylysis，AS）相伴的葡萄膜炎之间的相关性国内尚无大宗病例的研究报道，我们用多聚酶链反应(Polymerase　chain　reaction，PCR)方法和传统的微量淋巴细胞毒试验探讨了157例前葡萄膜炎与HLA-B27的相关性。

　　1　材料和方法

　　检测对象为中山眼科中心葡萄膜炎专科门诊的前葡萄膜炎患者，共157例，均为汉族，其中AAU67例，AS伴发的AAU20例，其它类型前葡萄膜炎70例，对照为广东地区708个汉族健康人。

　　取受检者血，加入抗凝剂，用酚抽提法提取DNA。所用HLA-B27序列特异引物为：（1）5′-CAGTCTGTGCCTTGGCGTTGC，（2）5′-GGCTACGTGGACGACACGCT，扩增产物为144bp；我们选择人类生长激素基因特异性引物为内对照，序列为：（1）5′-GCCTTCCCAACCCCCTTA，（2）5′-TCACGGATTTCTGTTGTGTTT，扩增产物为429bp。以上引物均由加拿大真达科技贸易有限公司提供。PCR反应体系包括50～100ng基因DNA，多聚酶1U、B27特异性引物（0.5μmol）、200mdNTP和PCR缓冲液。实验过程为：95℃预先变性5min，在基因扩增仪上进行30个周期的热循环，3个温度条件分别是94℃30s、58℃40s、79℃60s。于2%琼脂糖凝胶上进行电泳20min，电压5V／cm，紫外灯下观察结果。

　　2　结果

　　为了比较PCR和微量淋巴细胞毒试验的一致性，我们对51例受检者同时进行两种试验，发现二者检查结果相同，所以我们将早期的微量淋巴细胞毒试验结果和后期的PCR所测结果一并计算。

　　在不同类型的前葡萄膜炎中，HLA-B27阳性率有显著差别，AS伴发的AAU患者阳性率最高，为70%，AAU患者的阳性率为49.25%，二者均显著高于正常人群中此抗原的阳性率(2.97%，P＜0.001)，慢性前葡萄膜炎患者的阳性率(4.28%)与正常人群则无显著性差别(表1)。

表1　不同类型前葡萄膜炎和正常人群的HLA-B27阳性率比较

　　Tab．1　The　prevalence　of　HLA-B27　antigen　in　patients

　　with　anterior　uveitis　and　healthy　individuals

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