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角膜中期保存液的研制和临床应用

http://www.cnophol.com 2008-11-5 14:55:22 中华眼科在线

  结果

  1.兔角膜内皮细胞活性率的变化:见表1及图1~4。经统计学处理,在两种保存液中保存不同时间内皮细胞活性率比较,差异无显著性(P>0.05)。

图1 DX液保存10d的兔角膜内皮细胞台盼蓝-茜素红染色×100

  %26#11;图2%26#14;Optisol液保存10d的兔角膜内皮细胞台盼蓝- 茜素红染色×100

  %26#11;图3 DX液保存20d的兔角膜内皮细胞台盼蓝-茜素红染色×100

  %26#11;图4 Optisol液保存20d的兔角膜内皮细胞台盼蓝 -茜素红染色×100

表1 两种保存液中保存不同时间兔角膜内皮细胞活性率比较(±s,%)

保存液 时 间(d)
5 7 10 15 20
DX液 99.6±5.8 98.6±0.5 98.6±0.5 93.6±4.2 91.3±4.4
Optisol

  液

99.3±0.3 99.3±0.3 98.7±0.4 94.2±2.8 90.3±2.8
t值 0.12 0.00 0.35 1.28 0.18
 P值 >0.05 >0.05 >0.05 >0.05 >0.05

  2.酶组织化学染色观察:在DX液和Optisol液中保存7、15 d的兔角膜内皮细胞3种酶组织化学染色均呈阳性反应;其染色透光密度值见表2。两组保存液染色透光密度值比较,差异均无显著性(P>0.05)。

表2 两种保存液中保存7、15 d兔角膜内皮细胞染色透光密度值比较(±s)

保存液

  (7 d) 

酶组织化学染色
乳酸脱氢酶 琥珀酸脱氢酶 葡萄糖-6-

  磷酸脱氢酶

DX液 1.03±0.07 0.98±0.23 0.89±0.15
Optisol液 1.91±0.11 1.23±0.41 0.91±0.55
  t值   2.60   1.50   0.10
 P值 >0.05 >0.05 >0.05
保存液

  (15 d) 

酶组织化学染色
乳酸脱氢酶 琥珀酸脱氢酶 葡萄糖-6-

  磷酸脱氢酶

DX液 1.69±0.28 1.64±0.29 1.22±0.37
Optisol液 1.94±0.31 1.97±0.25 1.47±0.23
  t值   1.20   1.72   1.15
 P值 >0.05 >0.05 >0.05

  3.细胞超微结构改变:在DX液和Optisol液中分别保存10 d的兔角膜内皮细胞扫描电镜和透射电镜检查基本正常。保存20 d后,扫描电镜显示内皮细胞均边界清楚,大小欠一致;透射电镜显示细胞膜均完整,部分线粒体肿胀,细胞内有空泡(图5~12)。

图5 DX液保存10D的兔角膜内皮细胞扫描电镜观察×800

  %26#11;图6 Optisol液保存10d的的兔角膜内皮细胞扫描电镜观察×800

  %26#11;图7 DX液保存20d的兔角膜内皮细胞扫描电镜观察×800

  %26#11;图8 Optisol液保存20d的兔角膜内皮细胞扫描电镜观察×800

  %26#11;图9 DX液保存10d的兔角膜内皮细胞透射电镜观察×10000

  %26#11;图10 Optisol液保存的10d兔角膜内皮细胞透射电镜观察×10000

  %26#11;图11 DX液保存20d的兔角膜内皮细胞透射电镜观察×10000

12 Optisol液保存20d的兔角膜内皮细胞透射电镜观察×10000

  4.临床应用结果:在DX液中的37只人眼角膜,分别保存2~11 d,平均5.54 d,在Opitsol液中的30只人眼角膜,分别保存2~13 d,平均6.63 d,两组保存时间比较,差异无显著性(t=1.78, P>0.05)。角膜片供、受体平均年龄DX液和Optisol液分别为:供体29.05岁和24.16岁(t=1.97);受体41.76岁和39.28岁(t=0.86),两组供、受体平均年龄比较,差异无显著性(P>0.05)。术前两种保存液角膜内皮细胞活性率均值分别为(90.00±9.25)%和(91.88±3.70)%, 差异无显著性(t=0.14,P>0.05)。术后1周内67只植片全部透明。DX液和Optisol液保存的角膜植片内皮细胞图像处理结果:平均密度分别为(2 204.56±689.59)个/mm2和(2 392.41±807.72)个/ mm2,两组差异无显著性(t=0.69,P>0.05);内皮细胞平均面积分别为551.18 μm2和505.84 μm2,两组差异无显著性(t=0.00,P>0.05);内皮细胞最大面积分别为1 318.87 μm2和984.89 μm2,两组差异无显著性(t=1.50,P>0.05);内皮细胞最小面积分别为153.24 μm2和184.91 μm2,差异无显著性(t=0.60,P>0.05);六边形细胞所占比例分别为54.0%和48.0%,差异无显著性(t=1.06,P>0.05)。

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(来源:互联网)(责编:duzhanhui)

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