讨论

　　80年代前，在穿透性角膜移植手术后早期，角膜植片混浊的主要原因为保存的供体角膜内皮细胞活性不良；随着眼库保存技术的进步，现代穿透性角膜移植手术后失败的主要原因是免疫排斥反应导致的角膜植片混浊。在单纯依靠进口Optisol液不能满足需要的情况下，我国多数眼库仍然使用湿房保存方法，如果我们能够制作一种配制简单，价格相对低廉，且保存水平接近国外Optisol液的角膜活性中期保存液，将有益于我国眼库工作的发展。

　　DX液与Optisol液成分的不同之处在于DX液含有地塞米松，并去除了TC-199和多种维生素、上皮细胞生长因子等繁杂成分。中期保存液均以细胞培养基作为基础液，为保存的角膜提供所需的营养物质。4℃状态下，内皮细胞的代谢处于明显的低下状态，亦不产生增殖^［6，7］，细胞只需要最基本的营养物质。目前我们尚不能生产一种满足细胞全部生理代谢所需物质的基础液。MEM是目前最常用和最基本的细胞培养基，它含有所有的必需氨基酸、谷氨酰胺、葡萄糖和主要维生素等物质，为了简化配制过程，我们选用了细胞培养基MEM作为DX液的基础液。

　　皮质类固醇可以稳定细胞的溶酶体膜及其它生物膜，增强细胞对毒素和损害的抵御能力^［8］，防止内皮细胞的自溶及稳定细胞内环境，从而更好的保持内皮细胞的形态和功能^［9，10］，因此，在DX液中加入0.05 mmol/L的地塞米松。实验结果显示，在DX液中保存15d时3种酶活性仍保持高水平，保存20 d的兔角膜内皮细胞活性率高达91.3%；扫描电镜结果显示，在DX液中保存10 d的角膜，内皮细胞无变化，保存20 d时细胞膜仍完整无损；人角膜植片平均保存时间5.5 d，最长时间11 d，其中16只角膜保存时间均在1周以上，术后临床观察和角膜内皮细胞显微镜检查，结果均基本正常，说明人角膜植片保存于DX液中约1周，完全可以满足临床需要。

　　评价保存的供体角膜内皮细胞的活性，既往主要是依靠观察手术后1或2周内植片的厚度，在角膜内皮细胞显微镜问世以后，直接观察角膜内皮细胞的方法得到广泛应用。手术后角膜植片如有水肿，内皮细胞呈像将很困难，计算机图像处理系统亦无法工作，因此检查时间宜在术后1或2周进行。如果在眼库保存技术上存在问题，术后早期角膜植片即可出现异常；在2周以后出现的角膜植片混浊多因免疫排斥反应引起，与眼库保存角膜的技术无关。因此选择在术后1周内对保存在DX液中的人角膜植片内皮细胞进行检查，结果显示细胞清晰可见，形态和密度均与Optisol液保存结果无差异，证明了DX液保存人角膜植片的可靠性。

　　参考文献

　　1　McCarey BE, Kaufman HE. Improved corneal storage. Invest Ophthalmol, 1974,13:165-173.

　　2　Walkenbach RJ, Corwin JG, Ye GS. Corneal function after storage in commercial eye bank media. Invest Ophthalmol Vis Sci ，1991，32:1551-1557.

　　3　Kim KS, Edelhauser HF, Holley GP, et al. Corneal endothelial permeability of human tissue after storage in Optisol. Am J Ophthalmol, 1994,117:385-393.

　　4　Kaufman HE, Beuerman RW, Steinemann TL, et al. Optisol corneal storage medium. Arch Ophthalmol, 1991,109:864-868.

　　5　谢立信，李贵仁，白林，等. 人脐带血清营养液活性保存角膜实验研究临床应用报告. 中华眼科杂志，1981,17:294-298.

　　6　Treffers WF. Human corneal endothelial wound repair：in vitro and in vivo. Ophthalmology, 1982,89:605-613.

　　7　Hoppenreijs VP, Pels E, Vrensen GF, et al. Corneal endothelium and growth factors. Surv Ophthalmol, 1996,41:155-164.

　　8　Panda A, Kumar G, Basak SK, et al. The effect of corticosteroid and reduced glutathione on the endothelial viability during culture in MK medium. Acta Ophthalmol （Copenh）, 1994,72:731-736.

　　9　孙秉基，徐锦堂. 角膜病的理论基础与临床. 北京：科学技术文献出版社，1994.23.

　　10　王正祥，王丽天，吴念祖，等. 兔放射状角膜切开术超微结构观察. 中华眼科杂志，1993，29:296-298.

（收稿日期：1999-03-08）

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