中华眼底病杂志 1999年第2期第15卷 论著
作者：张勇进 Grenham TRELAND Mike BOULTON
单位：作者单位：200031上海医科大学眼耳鼻喉科医院眼科(张勇进)；Dept of Ophthalmology,Manchester University,U.K．(Grenham TRELAND、Mike BOULTON)
关键词： Bruch膜/病理学；色素上皮，眼/病理学；黄斑变性；脂质累积病；染剂和染色法
【摘要】 目的 验证Bruch膜及视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)脂类沉积与年龄的关系，以及老年性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)病眼的脂类沉积特点。 方法 应用组织化学染色的方法，对32例尸体正常眼球(20天～84岁)及2例尸体患AMD病眼进行研究，检测其Bruch膜及RPE中的脂类沉积。 结果 正常眼中Bruch膜中脂类沉积随年龄增长而增加，以中性脂类为主。黄斑区较周边部显著。RPE染色的强度和面积也与年龄有关。AMD眼脂类染色较正常老年眼更强烈，亦以黄斑部为著。 结论 老年性Bruch膜与AMD眼有共同的区域性分布，可能在老年性改变及AMD的发展中有着重要作用。随年龄增强的RPE脂类染色可能反映了细胞内脂褐素的积聚。
中国图书资料分类法分类号 R773 R774.5 R446.8
Lipid deposition of senile Bruchs membrane and retinal pigment epithelium
zHANG Yongjin,Grenham IRELAND,Mike bOULTON.Department of Ophthalmology,Eye and ENT Hospital,Shanghai Medical university,Shanghai 200031，China
【Abstract】 Objective To investigate the relationship between lipid deposition in the Bruchs membrane and the retinal pigment epithelium(RPE)cells and age,and characteristics of lipid deposition in the age-related macular degeneration(AMD). Methods Thirty-two normal eyes from dead people aged 20 days to 84 years and 2 AMD eyes from corpses were examined by using histochemistry stains to identify characteristics of lipid deposition in the Bruchs membrane and the retinal pigment epithelium(RPE)cells. Results In the normal eyes,lipid deposition in the Bruchs membrane increased with aging,especially in the macular region.The main composition of the lipid deposition was neutral lipid.AMD eyes were more intensively stained than normal aged eyes,especially in the macular region. Conclusion Lipid deposition distributed in the same regions both in normal and AMD eyes in the elderly,which may play an important role in the aging process and the development of AMD.Stain of RPE increasing with aging may reflect the deposition of lipofuscin in the cells.
【Key words】 Bruch membrane／pathology Pigment epithelium of eye/pathology Macular degeneration Lipoidosis Stains and staining
Bruch膜老年性碎屑(debris)的沉积被认为在AMD的发展过程中有着重要作用［1-6］。早期研究表明，随着年龄增长，Bruch膜的嗜碱性和PAS染色增强［7］，推测可能与脂类成分的增加有关［1，3］，但当时难以得到直接证据。近年来，随着组织化学和生化技术的提高，这种推测已得到证实［3］。脂类的增加可能改变Bruch膜的扩散性能，而导致AMD［1-6，8］。此研究将进一步验证Bruch膜脂类沉积的特点及脂类性质，比较脂类沉积的区域性特点及AMD眼与正常眼老年性改变的脂类沉积特点。
1 材料与方法
32例正常人及2例AMD患者尸体眼球由英国曼彻斯特皇家眼科医院眼库或美国费城国家疾病研究交流中心提供。正常眼无临床眼病及明显的显微镜下的病理改变，供眼者的年龄范围为20天～84岁，分为三个年龄组：①年轻组：10例(20天～28岁)；②中年组：8例(31～60岁)；③老年组：14例(61～84岁)。2例AMD眼的临床类型不明，年龄为67及80岁。
经10%中性福尔马林固定的眼球，去除眼前段及玻璃体及视网膜后，分离出以黄斑区为中心的6mm×7mm矩形组织块，作为黄斑区标本；周边标本(6mm×4mm)取自距中心凹10mm的颞侧周边部。标本组织块包埋于Tissue-Tek oCT复合物(Sigma)中，经液氮冷冻后，切制成7μm厚的组织切片。
三种组织化学染色方法用来鉴别脂类成分：油红(oil red O)用来识别中性脂；溴-苏丹黑B(bromine sudan black B)使所有类型的脂类着色；而溴-丙酮-苏丹黑B(bromine-acetone-Sudan black B)，在丙酮将其他脂类溶解去除后，鉴别出不溶于丙酮的磷脂。阴性对照采用脂溶剂(1∶2氯仿及甲醇混合液含1%HCl)处理后的组织切片［9］。脂类染色方法同文献所述［1，2，9］。染色程度分为4级：①阴性，不超过背景染色；②轻度染色；③中度染色；④重度染色。由两名研究者通过“双盲检查”决定，遇有意见分歧时，协商解决。
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