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2 结果
特异性[3H]SCH 23390标记D1受体位点在全视网膜上均可见到，在外网状层及内网状层分布稍显密集，并可被（+）－butaclamol抑制，但是无明显区域上的差异。
[3H]Spiperone 标记D2受体位点在全视网膜上均可见到，在光感受器及色素上皮层密集，用（+）－butaclamol可以减少[3H]Spiperone在这个区域的标记位点，示这个区域是[3H]Spiperone的特异性结合，并显示了明显的区域分布差异。
同一载玻片粘附正常和近视二组鸡视网膜冷冻切片，光学显微镜下观察：同一玻片上近视鸡视网膜组织结构与正常鸡有所不同，显示光感受器层增宽，细胞核增多。
[3H]SCH 23390标记D1位点区域分布不明显，故随机抽片，在高倍镜下（×100）加物镜尺随机数不同区域每平方微米银粒数减去本底银粒数，比较正常与近视鸡视网膜银粒数目，结果正常组银粒数为25.00±6.45，近视组为34.55±6.93，提示近视组D1位点数与正常组D1位点数差异明显（P＜0.05）。近视组数目高于正常组。
[3H]Spiperone标记位点在同一玻片上近视组视网膜D2标记位点（银粒）密度明显高于正常组，并且集中在光感受器和色素上皮层上。
3 讨论
近几年用ARG方法研究许多动物视网膜DA受体均获得成功，但鸡视网膜D1、D2受体的ARG分析未见报道。鸡是近视研究中十分有用的动物模型，了解鸡视网膜DA受体分布状态十分必要。[3H]SCH 23390为D1受体专一配体，[3H]Spiperone可以与D2受体和5－HT受体结合，用Ketaserine可以排除spiperone与5－HT2受体的结合。（+）－buta-clamol可以与D1、D2、5－HT受体结合，用浓度高于放射性配体的（+）－butaclamol作非特异竞争剂抑制，能够充分减少非特异结合位点。
在人类和一些动物视网膜的研究中[4，5]观察到的D1结合位点集中在外网状层和内网状层，即从光感受器终端到水平细胞层，表现出区域性特点。用[3H]SCH 23390标记鸡视网膜DA－D1显示其分布无明显区域性差异，但还不能证实是否属于种属差别。视网膜DA是视网膜细胞之间的递质，DA能神经元（网间细胞，部分无长突细胞）的末梢与水平细胞成突触，释放DA作用到水平细胞上的D1受体，D1受体介导DA的作用，降低视网膜对光的反应，D1受体为突触后受体。因此在研究中显示的分布特点可能与其功能有关。
[3H]Spiperone标记D2受体位点的研究结果与其它研究者用免疫组化方法或ARG方法标记D2受体的结果相似[6]。即D2在光感受器和色素上皮层分布集中。视网膜上D2受体是突触前受体和自身受体，位于视网膜光感受器和内外网状层，它的活动可以抑制DA能网间细胞释放DA，调节DA释放，D2受体分布特点与其功能是相符的。
刚孵出的小鸡缝合眼睑二周形成剥夺性近视后，用ARG方法显示近视鸡视网膜D1、D2受体结合位点增多，说明D1和D2受体参与了FDM的形成机制，这与Rohere等人[7]的结论不同，他们认为FDM中DA作用位点是在视网膜色素上皮细胞上的D2受体。本研究中发现近视鸡视网膜多巴胺D1和D2受体数目均高于正常，这一结果同匀浆法进行放射性配体受体结合分析（Radioligand Biading Assay，RBA）的结果相似[8]。受体数目增多称为向上调节或上增性调节（up－regulation），并且敏感性增高。受体数目和反应性变化受其周围生物活性物质（神经递质，激素或药物等）的调节。一般来说受体数目的变化与其周围的生物活性物质的浓度呈负相关性[9]。有人用高效液相方法测定FDM鸡视网膜DA生物水平，发现DA生物水平下降。近视视网膜DA受体两种亚型的密度增加验证了近视状态下视网膜DA生物水平下降的结论[1，10，11]。还有人发现暗环境下视网膜D1和D2受体均上调[12]。可以推论由于FDM鸡视网膜持续性光输入减少，引发了上述一系列的变化。
D1受体有传统的光整合作用，介导自然通道，D2介导反馈调节DA能神经元释放DA的通道，在视网膜局部形成反馈环路。这种反馈环路与FDM中两种DA受体的增多，支持了局部视网膜参与FDM的调控论点[13，14]。
总之，放射自显影首次用于FDM的研究，结果表明：鸡视网膜DA两种亚型受体的分布不同以及FDM鸡视网膜DA两种亚型受体数目较正常增多，为上增性调节。这与近视状态下DA生物水平下降有关，两种受体的改变亦支持了局部视网膜参与FDM的调控论点。
参考文献
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（收稿：1999－04－09） 上一页 [1] [2] |
