2 结果
2.1 视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞内NOS mRNA及NSE蛋白的定位
应用碱性磷酸酶显色体系NOS mRNA杂交信号和NSE的免疫反应性(IR)均呈紫色细颗粒,并位于细胞质,在EG标本上可见HXO-Rb44细胞呈现神经样突起(见图1,2)。
2.2 8-Br-cAMP对HXO-Rb44细胞NSE-IR,NO含量,NOS酶活性和NOS mRNA及Bcl-2mRNA基因表达的效应(见表1)
图1 人HXO-Rb44细胞NOS mRNA原位杂交信号,a为实验组(EG),b为对照组(CG),信号细颗粒位于细胞质,EG强于CG(×1000);c为NOS mRNA斑点印迹信号,EG强于CG 图2 人HXO-Rb44细胞NSE免疫组化反应性,a为实验组(EG),b为对照组(CG),免疫反应细颗粒位于细胞质,EG强于CG(×1000),在EG组可见HXO-Rb44细胞呈现神经样突起;c为NSE蛋白斑点印迹信号,EG强于CG
Fig.1 NOS mRNA in situ hybridization signal in human HXO-Rb44 cells(Fig a:experiment group,EG;Fig b:control group,CG).The signal as localized in the cytoplasm,EG stronger than CG(×1000);Fig c:NOS mRNA dot bolt signal,EG stronger than CG.
Fig.2 NSE-IR in human HXO-Rb44 cells(Fig a:experiment group,EG;Fig b:control group,CG).The IR localized in the cytoplasm,EG stronger than CG(×1000).In the EG,some neurites projected from the retinoblastoma cells were found under observation with the microscope;Fig c:NSE protein dot blot signal,EG stronger than CG
表1 8-Br-cAMP对HXO-Rb44细胞NSE-IR,NO含量,NOS酶活性和NOS mRNA及Bcl-2mRNA基因表达的效应(n=9, ±s)
Tab.1 Effects of 8-Br-cAMP on NSE-IR,NO content,NOS activity,and the gene expression of
NOS mRNA and Bcl-2mRNA in retinoblastoma HXO-Rb44 cells(n=9, ±s)
|
NSE-IR(OD) |
NO(μmol/L) |
NOS(OD) |
NOS mRNA(OD) |
Bcl-2mRNA(OD) |
experimental group |
5.50±0.98 |
1.48±0.09 |
3.08±0.95 |
2.97±0.83 |
2.47±0.66 |
control group |
3.55±1.01 |
1.05±0.06 |
1.66±0.29 |
1.85±0.58 |
3.27±0.6 |
P value |
<0.05 |
<0.01 |
<0.01 |
<0.01 |
<0.02 |
由表1所示,经统计学处理,实验组NOS mRNA基因表达信号,NSE-IR,NOS活性及NO含量与对照组比较,EG>CG,有显著差异,P<0.01~0.05,而Bcl-2mRNA基因表达信号为EG<CG。结果表明,8-Br-cAMP可促进HXO-Rb44细胞NO的生成和NOS mRNA的表达,提高NOS的活性及NSE的免疫反应性,降低Bcl-2mRNA的基因表达。
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