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3讨论
3.1 NFκB的生物学特性
NFκB又称κ基因结合核因子（nuclear factor kappa binding, NFκB）是广泛存在于细胞中的具有多向性调节作用的蛋白质分子，因最先发现其结合部位位于编码B细胞免疫球蛋白κ轻链基因的增强子中而得名。NFκB是由Rel蛋白家族成员组成的二聚体。哺乳动物细胞中有5个NFκB/Rel家族成员，分别为p65(RelA)、p105/p50、p100/p52、RelB和cRel，均具有一个Rel同源区的结构片段。其中发挥主要信号转导作用的是p50p65异源二聚体，称为NFκB。该因子是一类参与一系列基因表达调控的关键性核转录因子。多种不同的刺激信号可激活核转录因子参与细胞生长、分化、黏附、凋亡及炎症反应。作为一种多向性调节蛋白，NFκB介导细胞存活信号，防止细胞凋亡，其信号通路可能是TNF受体信号转导途径，诱导抗凋亡基因Bcl2家族的表达。但某些情况下，NFκB也能诱导细胞凋亡，提示NFκB与凋亡的关系可能是随刺激因素的变化、细胞的不同种类及不同发育阶段等而变化的。研究表明在许多视网膜疾病中NFκB都不同程度的被激活，说明NFκB所介导的广泛的生物学作用与多种视网膜疾病的表现密切相关。许多研究显示，细胞抗凋亡作用的启动信号仍然是各种生存因子通过受体激酶的介导，激发以NFκB为中心的正向级联放大的信号转导通路，促使NFκB调控的抗凋亡基因包括IAP、Bcl2家族成员等的激活及Bax、Caspase9等凋亡相关基因的下调。Choi等［2,3］为了探索NFκB在视网膜神经节细胞死亡过程中的作用将成年小鼠视神经从距眼球5mm处截断用免疫组化方法测定NFκB活化情况。结果发现 NFκBp50随时间推移而显著增加,神经节细胞也相应出现核固缩等凋亡表现，因此推断出NFκB与视网膜神经节细胞凋亡可能有密切关系，但NFκB对神经节细胞的凋亡是起介导作用还是代偿作用仍不清楚。他们在继续研究中用溴化乙锭和NFκB抗体对小鼠视网膜节细胞进行双着色实验,结果显示NFκB只出现在存活的神经节细胞中。其它研究[410]也表明NFκB具有确切的抗凋亡作用。
3.2 AG对NFκB表达的影响
本实验通过建立大鼠慢性高眼压模型，运用免疫组化方法及Western blotting，发现NFκB在高眼压第3d开始表达，在7～14d达到峰值，21d后维持在一个相对较高的水平。提示我们青光眼病理机制应该是一个损伤与保护相互作用的慢性过程。该模型NFκB表达时程与Tinghuai等[11]的表述不同，其中的原因可能与模型的制作方式有关。我们采用的鼠视网膜慢性高眼压模型试验结果表明，神经节细胞随时间变化的规律和NFκB的表达随时间变化的规律大体相同，AG治疗组亦表现为NFκB表达增强及神经节细胞损失减少，从而起到保护作用。本实验在应用AG 3d以后NFκB的表达水平与相同时点慢性高眼压组相比均增强，统计学差异显著（P<0.05），在建模后21，28d，AG应用组视网膜厚度大于慢性高眼压组（P<0.05），提示AG有可能通过激活NFκB途径来实现对慢性高眼压视网膜的保护作用。
【参考文献】
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11 Wu TH, Chen YG, Samuel KS, et al. NFkappa B activation in lightinduced retinal regeneration in a mouse model. Invest Ophthalmol Vis Sci 2002;43(9):28342840 上一页 [1] [2] |
