马汀1 马志中2 胡运韬2
1解放军第401医院眼科 266071
2北京大学眼科中心100083
目的 观察透明质酸的受体CD44、RHAMM在大鼠正常及脱离视网膜中的表达变化；探讨透明质酸及其受体对视网膜组织细胞运动和增殖的调控的可能机制。
方法 选用1.2%羟丙基甲基纤维素（MHC）作为视网膜下植入物，制作经巩膜的半球状视网膜脱离动物模型：1、采用免疫组织化学方法和免疫荧光激光共聚焦显微镜技术观察正常视网膜及实验性视网膜脱离中IPM的HA受体CD44和RHAMM的分布和表达变化；2、利用Western Blot分析CD44、RHAMM在正常及脱离的视网膜组织中蛋白表达的变化；3、采用RT-PCR 和real-time quantitative PCR技术，分析CD44、RHAMM在正常及脱离的视网膜组织中mRNA表达的变化。
结果 在经巩膜途径用1.2%羟丙基甲基纤维素制作的实验性视网膜脱离模型中：1、视网膜冰冻切片免疫组织化学DAB显色与免疫荧光共聚焦显微镜观察结果一致，随视网膜脱离时间的延长，CD44、RHAMM的表达呈上升趋势；2、视网膜铺片免疫组织化学DAB显色与免疫荧光共聚焦显微镜观察结果一致，随视网膜脱离时间的延长，CD44、RHAMM的阳性表达上调；3、蛋白质免疫印迹分析，随视网膜脱离时间延长，CD44的蛋白表达逐渐增强；RHAMM的蛋白表达量过低，不宜进行半定量分析；4、RT-PCR及real-time quantitative PCR结果显示：视网膜脱离后，CD44 mRNA的表达上调。
结论 CD44和RHAMM作为光感受器细胞外基质成分HA的受体，在实验性视网膜脱离中，表现出明确的阳性表达上调趋势。它们分别存在于Müller细胞和RPE细胞中，而这两种细胞在视网膜脱离时正是PVR的主要细胞成分。在以往的研究中证实，HA及其受体CD44和 RHAMM有参与组织修复增殖和细胞迁移运动的表现，所以，可以推测CD44和RHAMM在脱离视网膜的阳性表达上调，可能与发生PVR时Müller细胞和RPE细胞的运动迁移有关。
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