徐旭 高明宏 蓝平
沈阳军区总医院
目的 通过建立大鼠缺血再灌注模型,以玻璃体腔注射的方式将Ad –PEDF转染视网膜组织,观察PEDF蛋白表达及其对大鼠视网膜形态的影响。
方法 利用细菌内重组的方法构建重组腺病毒载体Ad -PEDF,选用健康成年Wistar大鼠96只,随机分为正常组、缺血再灌注组、缺血再灌注+Ad-CMV组,缺血再灌注+Ad-PEDF组,每组按照时间点12小时、24小时、72小时、168小时分为4亚组,每亚组分别为6只大鼠。采用前房加压方法制做大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型,以Western blot ting方法检测各组不同时间点PEDF蛋白表达值。HE染色后应用图像分析软件系统测量视网膜内层厚度及神经节细胞层神经节细胞数量,以TUNEL方法计数凋亡细胞数量。
结果 Ad-PEDF组各时间点PEDF表达明显多于缺血再灌注组及正常组,Ad-PEDF组各时间点视网膜内层厚度均超过缺血组及缺血+Ad-CMV组,Ad-PEDF治疗组在各时间段神经节细胞数目多于缺血组及Ad-CMV组, Ad-PEDF组视网膜神经节细胞凋亡细胞少于缺血组及Ad-CMV组。
结论 色素上皮衍生因子基因治疗对大鼠视网膜缺血再灌注损伤具有保护作用。
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