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3讨论
视网膜再灌注时，视网膜组织恢复氧供的同时也使氧自由基爆发性增多并发生脂质过氧化，膜结构进一步损伤，组织水肿加重，神经纤维和线粒体高度肿胀。与此同时，还发生神经营养因子运输障碍、兴奋性氨基酸和各种细胞因子的释放,钙离子内流，不但直接产生细胞毒性，还激活各种凋亡基因而引起细胞凋亡[2,3]。最终导致视网膜节细胞层和双极细胞层内的神经元丢失，这些变化的特征与视网膜急性缺血和急性青光眼的改变很相似。谷氨酸作为视网膜中一种主要的兴奋性氨基酸,广泛分布于光感受器、双极细胞和神经节细胞层,在视网膜信号传递过程中发挥举足轻重的作用[4]。高眼压持续一定时间后，谷氨酸释放与吸收的动态平衡打破，当细胞外的谷氨酸水平升高或突触释放增加及摄取降低时，就可引发兴奋毒性，是导致视网膜神经节细胞凋亡的重要机制[5]。如何在短时间内清除或失活细胞外过量的谷氨酸成为维持视网膜正常生理功能的关键。我们发现,治疗组与对照组在缺血再灌注后都出现了视网膜谷氨酸含量显著增高（P<0.01）。治疗组的Glu含量明显低于对照组(P<0.05)，说明己酮可可碱可降低视网膜Glu的含量，这可能是由于己酮可可碱可以改善红细胞的变形能力，增加组织氧分压，促进血液微循环的作用，改善了高眼压灌注所产生的缺血缺氧状态。另外己酮可可碱可以刺激血管内皮释放前列环素，抑制微血管收缩和红细胞、血小板聚集，抑制过氧化物释放和血小板活化因子的激发，使血液黏滞度降低，从而表现出抗凝、促纤溶和扩血管等促进循环作用[6]，使血流加速，这样可以使视网膜产生的谷氨酸较快地扩散。 两组随时间变化的趋势是相同的，均在48h达到峰值。 我们观察到随着缺血再灌注时间的延长，大鼠视网膜线粒体钙含量逐渐增高，提示钙超载是缺血再灌注视网膜损伤的因素之一。缺血再灌注后，钙离子可由多种途径进入细胞内，线粒体则通过其膜的单向转运机制摄取胞浆中过多的钙离子，实现其调节细胞胞浆钙离子浓度的作用。但钙离子浓度的增高，激活了磷脂酶A2，磷脂酶A2降解线粒体膜上的磷脂，引起线粒体膜通透性增强，使得水分和钙离子易于进入线粒体内，导致线粒体肿胀和钙含量的显著增高。本实验显示己酮可可碱能降低视网膜组织细胞线粒体钙离子含量，抑制钙内流发挥抗继发性损伤的保护作用[7]。
表1 大鼠视网膜再灌注后视网膜ERG相对b 波的动态变化（略）
aP<0.05 vs对照组
表2 再灌注后视网膜谷氨酸与细胞线粒体钙含量的变化（略）
aP<0.05，bP<0.01 vs对照组
视网膜缺血再灌注损伤最先发生的是电生理变化。ERG是视网膜受光刺激后，在视网膜节细胞电冲动之前记录到的一簇电反应，是多种电位变化的复合。目前，国内外均把ERG作为反映视网膜功能变化一个敏感的指标[8]，正常的ERG 反应有赖于视网膜和脉络膜结构的完整性。1965年Fuiino通过治疗证实,当视网膜缺血时,首先影响b波,论证了产生b波的组织对缺血影响比较产生a波和c波的组织更敏感[9]。为此Founds作了进一步研究报道了缺血1h后ERG的恢复变慢并为不完全恢复,尤其是b 波。由此可见,有利于RIR 损伤后b 波恢复的药物对RIR 具有防治作用[10]。当视网膜再灌注后,视网膜的损伤与修复并存。经过研究发现,视网膜的损伤在再灌注后24h最重,因而出现了再灌注24h时ERG波的低谷。24h后,视网膜的修复功能增强,因而ERG逐渐恢复。己酮可可碱通过以下方式促进ERG b波的恢复:(1)改善微循环、增加红细胞的变形性、增加组织氧分压[11];(2)PTX属甲基黄嘌呤衍生物,由于分子式的相近通过竞争性抑制氧自由基(oxygen free radicals,OFR)的产生[10],也可增加SOD的活性发挥清除和抑制氧自由基等方面的作用[13];(3)降低视网膜谷氨酸含量;(4)降低视网膜线粒体钙离子含量，减轻钙超载导致的继发性损伤。己酮可可碱降低视网膜谷氨酸含量，降低视网膜组织细胞线粒体钙离子含量，可促进ERG b波的恢复，缩短视网膜缺血再灌注的病理过程，对大鼠视网膜缺血再灌注损伤有一定的保护作用。视网膜缺血再灌注损伤是一个复杂的、多途径的病理过程，以单独的方式保护它们难以达到最佳效果，今后还可以与联合用药的保护效果作比较，以寻找最佳的保护方法。
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