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高糖环境下视网膜血管周细胞内β1，4半乳糖基转移酶表达的改变
刘堃 叶纹 许迅* 江建海**
复旦大学附属华山医院 眼科 200040
视网膜血管周细胞的凋亡是糖尿病性视网膜病变的早期表现之一，引起周细胞的凋亡的机制目前尚不完全明了。β1，4半乳糖基转移酶是研究较早的一种糖基转移酶，参与蛋白翻译后修饰等多种生理功能，目前许多研究表明细胞内β1,4半乳糖基转移酶上调与细胞凋亡相关，有研究发现非酶糖基化产物（AGEs）能上调细胞内半乳糖基转移酶的活性。
【目的】：本研究的目的是了解高糖环境下牛视网膜血管周细胞内β1，4半乳糖基酶的表达情况以及细胞凋亡情况。
【方法】：原代培养牛视网膜周细胞，采用高糖培养基（葡萄糖浓度为30mmol/LDMEM培养基）培养24、48，72小时，以葡萄糖浓度为5mmol/LDMEM培养基培养作为正常对照，甘露醇作为渗透压对照。采用RT-PCR，细胞免疫组织化学和免疫印迹法分别在RNA和蛋白水平观察高糖培养下β1，4半乳糖基酶的改变情况；同时采用流式细胞仪，hoechst染色分别观察高糖培养24、48和72小时后细胞凋亡的情况。
【结果】：通过以上三种不同的检测方式均证实了，在高糖培养环境下，培养24小时后细胞内β1，4半乳糖基酶的表达即上调；同时，高糖培养72小时后周细胞的凋亡上升。
【结论】：高糖环境下，牛视网膜血管周细胞内β1，4半乳糖基转移酶的表达上调，其可能参与了高糖环境下的周细胞的凋亡，其参与机制有待进一步明确。
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