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HIF-1α和VEGF在实验性脉络膜新生血管中的表达
杨秀梅 王雨生 徐建锋 张鹏 杜红俊 白建伟
陕西西安 第四军医大学西京医院全军眼科研究所， 710032
目的 探讨HIF-1和VEGF在532nm倍频激光诱导的棕色挪威(BN)大鼠脉络膜新生血管(CNV)生成中的表达。
方法 应用532nm倍频激光对36只雄性BN大鼠实验眼进行视网膜光凝，建立CNV模型，分别于光凝后1、3、7、14、21及28d行荧光素眼底血管造影(FFA)，处死大鼠后摘除眼球，制作组织病理学标本观察，原位杂交法，免疫组化法和免疫荧光双标记法检测HIF-1α和VEGF在mRNA和蛋白水平的表达。
结果光凝后3d，Ⅷ因子阳性的内皮细胞由破裂的Bruch膜长入视网膜下，但尚未形成CNV；光凝后7d，Ⅷ因子阳性的内皮细胞围成的血管样结构，FFA检查可见相应区域有圆盘状荧光素渗漏，表明CNV生成。原位杂交法观察，正常大鼠视网膜有HIF-1α和VEGF mRNA的表达；光凝后3d时HIF-1α和VEGF mRNA呈强阳性表达，持续至7d。前者于光凝后3d达高峰，而后者于光凝后7d达高峰，14d后两者表达均迅速降低（P<0.05）。两者的表达具有显著的相关性（r=0.778，P<0.05）。免疫组织化学法和免疫荧光双标记法观察表明，正常大鼠视网膜几乎无HIF-1α蛋白的表达，而神经节细胞层、内核层、RPE层、视网膜及脉络膜EC可见有VEGF蛋白的表达。光凝后1d光凝区HIF-1α表达明显增加，而VEGF的表达无明显变化；3d时HIF-1α和VEGF蛋白呈强阳性表达，持续至7d。HIF-1α的表达在光凝后3d达高峰，VEGF在7d时达高峰，14d后两者表达均迅速降低（P<0.05）。两者的表达具有显著的相关性（r=0.588，P<0.05）。
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