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3 讨论
近视眼发病机制不明,目前尚无有效的病因学治疗。我们通过建立近视眼动物模型，研究近视眼的发病机制，以寻找有效的治疗手段。在眼球解剖上，雏鸡眼球与人眼球存在一些异同。鸡的巩膜分为外层的纤维层和内层的软骨层；而人眼球巩膜则无软骨层，仅有纤维层。鸡视网膜外颗粒层较人眼薄，无明显的视盘，而代之以称为“栉膜”的结构,鸡视网膜缺乏血管。除此之外，视网膜其余结构和脉络膜与人眼基本相似。另外，由于鸡与人的颌面部发育特征存在差异，导致双眼在面部的位置不同：鸡的眼球位于头面部的两侧；而人眼球位于头面部的正前方，这种解剖差异可能导致人眼比鸡眼更容易形成双眼单视功能。但雏鸡生长发育较快,生命及实验周期较短, 一生中眼屈光状态变化规律与人眼基本相似，来源丰富便利，价格低廉。鸡眼球的视觉正常发育与人眼相似，也受外界环境的密切影响：正常适量适时的光刺激；光线进入眼球后形成的焦点或焦平面与视网膜平面一致；甚至居住环境的高度、生活饮食习惯等都会对眼球正常的视觉发育起到重要的影响作用。且雏鸡作为较经典的动物模型，其技术与方法较成熟，已在基础研究领域应用很久。因此，我们选用雏鸡作为近视眼动物模型。目前常采用药物、离焦透镜、形觉剥夺、角膜激光屈光手术、晶状体摘除等方法诱导实验性近视眼的形成。我们利用半透明的眼罩遮盖实验眼，造成单眼全视野形觉的破坏，成功诱导和建立了雏鸡FDM动物模型，证明形觉剥夺可诱导后部巩膜向后生长延长，导致轴性近视眼。鸡FDM动物模型有其特异性：鸡的巩膜结构不同,除纤维层外并有软骨层，近视时主要是软骨层蛋白聚糖的合成增加，造成巩膜软骨层组织增多增厚，引起眼轴主动扩展[2,3]；任力濛等[4]研究也证实鸡FDM眼轴变长、眼球壁总厚度无明显变薄,提示FDM眼球代偿性生长加快可能是其眼球增大的原因之一,并非单纯扩张性膨大。本研究证实，正常雏鸡刚出生时呈远视状态，随时间远视度数逐渐减低，但至性成熟前期仍呈轻度远视状态。对刚出生的雏鸡实行形觉剥夺可诱导眼轴快速延长，出现高度近视状态，并随剥夺时间的延长，近视度数增加。可见从出生至性成熟前期，是视觉发育的关键时期，视觉的正常发育——正视化过程依赖于视网膜接受正常光刺激，形觉剥夺可导致眼轴延长，引起近视眼。
近视眼发病机制一直不明，因此严重制约近视眼的病因学治疗。近来研究显示,神经递质VIP作为视觉信息分子，在视觉诱导的近视眼形成中可能起到重要的信息传递与调控功能。VIP属于小分子的神经多肽，是一种特殊类型的神经递质—神经肽递质，广泛分布于神经系统与消化系统。VIP与其受体结合后，主要通过cAMP依赖的蛋白激酶途径发挥生理作用。VIP与受体结合后，首先激活腺苷酸环化酶（AC），催化ATP转化为cAMP,cAMP随之激活cAMP依赖性蛋白激酶A（PKA）。PKA又可使细胞内多种蛋白质磷酸化，产生生理效应，尤其是在细胞的增殖分化中有重要作用，并抑制多种细胞因子的合成与分泌；在中枢神经系统，VIP不仅具有神经递质的作用，还兼有神经调质、神经激素释放因子和强大的神经营养作用[5]。VIP可促进神经干细胞向多种视网膜细胞的分化；刺激脉络膜和视网膜各种细胞的生长和分化；在视网膜色素上皮（RPE）培养中，VIP是调控cAMP信号途径的神经递质和调质中最有效的刺激物之一；VIP对分化和终末分化细胞内的PP60、酪氨酸活化酶起到有效的调控；刺激视网膜所有磷酸化作用和去磷酸化作用；刺激视网膜表面大分子分泌和从末端到RPE层基底面的轴浆转运能力的提高；促进脉络膜和RPE黑色素的生成。证明VIP是功能性视网膜发育期分化的促进因子[6-9]。
在以往的研究中，VIP在FDM中的表达与调控研究较少。Raviola等[10]和Stone等[11]证实单眼FD导致该眼形成轴性近视眼成为形觉剥夺性近视眼（FDM）；并用免疫组化的方法检测FDM的视网膜内丛状层的无长突细胞亚型中VIP的表达明显上调；但未检测VIP核酸转录水平表达的改变。本研究运用RT-PCR检测FDM中VIP在核酸转录水平的动态表达。研究结果显示VIPmRNA在雏鸡正常眼和FDM的眼球后壁均有丰富表达，且这一表达部位与一氧化氮合酶（iNOS）和TGF-β1表达部位[12,13]极其相似，可能的解释是表达VIP受体的细胞90%显示有神经源性一氧化氮合酶的定位[14]，这两种神经递质和TGF-β1在感光、视觉调控中均起到重要作用；单眼形觉剥夺可导致剥夺眼产生近视，其眼球后壁VIPmRNA表达明显上调，与对照眼差异显著。FDM中VIP在后部脉络膜、视网膜中表达丰富，广泛表达于视网膜内网层的第1、2亚层的无长突细胞的亚型，在该处VIP标记的无长突细胞的细胞突接受从其它无长突细胞和双极细胞轴突末端的突触输入；VIP免疫活性无长突细胞最常见的突触后靶目标是内网层1～3层的其它无长突细胞的细胞突，其次是双极细胞，神经节细胞的树突也是VIP免疫活性无长突细胞的突触后靶目标[15,16]。说明在FDM中VIP表达上调，作用于受体VIPR，可能影响视网膜内层信息传递回路，通过复杂的视网膜—脉络膜—巩膜调控机制，诱导相关近视信使最终作用于巩膜，导致巩膜主动重塑，产生近视眼，但其具体的调控途径还需进一步研究阐明。
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