增生性视网膜前膜中单核细胞趋化蛋白-1的表达
中华眼底病杂志 1999年第2期第15卷 增生性玻璃体视网膜病变研究
作者：徐莉莉 曾水清 万光明 王玲丽
单位：430022 武汉，同济医科大学附属协和医院眼科
关键词： 视网膜；玻璃体视网膜病，增生性；糖尿病视网膜病；白细胞介素类
中国图书资料分类法分类号 R774．5 R446
近年研究表明，某些生长因子具有促进增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy，PVR)和增生性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy，PDR)形成的作用。单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)被确认是有趋化及活化单核巨噬细胞作用的一种趋化细胞因子［1］。已有报道［2］在PVR、PDR及黄斑裂孔患者玻璃体液中测出MCP-1，并证实其水平与增生程度有重要相关性。但尚未见到增生膜中有关MCP-1表达的报道。我们应用间接免疫荧光法对PVR及PDR的视网膜前膜中MCP-1的表达进行了观察，现将结果报道如下。
1 资料和方法
1.1 研究对象 12例标本为我科玻璃体切割术中取出的视网膜前膜增生组织(PVR为D2级以上)，分别取自12例患者的12只眼，其中原发性视网膜脱离合并PVR、外伤性视网膜脱离合并PVR和PDR各4例，男性7例，女性5例，平均年龄34岁。
1.2 试剂与方法 ①主要试剂：MCP-1标准品(Gibco公司)，羊抗兔IgG/FITC(上海生物制品研究所)。②标本处理方法：玻璃体切割术中用眼内镊夹出前膜后，立即用4%甲醛固定，常规石蜡包埋，连续4 μm切片，贴于明胶载玻片上，常规脱蜡，0.5%胰蛋白酶消化20分钟，磷酸盐缓冲液(phosphate-buffer solution，PBS)洗3次，每片加第一抗体0.04 ml(多克隆兔抗人单核细胞趋化蛋白，1∶500稀释)，湿盒4 ℃过夜，PBS洗3次，加荧光标记第二抗体0.04 ml(羊抗兔IgG/FITC，1∶20稀释)，37 ℃湿盒避光孵育30分钟，PBS洗3次，甘油-PBS封片，Leito荧光显微镜观察及摄片。阴性对照：去一抗以PBS加二抗呈阴性［3］，阳性细胞显示荧光为绿色，阴性对照片未见阳性细胞。
2 结果
12例标本增生膜呈浓而密的荧光，其间可见散在或密集的细胞，分布不均，数量不等，部分细胞的胞膜及胞浆呈现荧光表达，胞核呈暗黑色，阳性细胞的大小不一，呈圆形或不规则形，三组病例的阳性细胞在形态学表现上无明显差异。
3 讨论
有报道，在血浆的样本中未测出MCP-1，而在PVR、PDR、黄斑裂孔患眼的玻璃体液中已测出［2］。我们在PVR(包括外伤性)和PDR患眼的视网膜前膜均发现有MCP-1阳性细胞，提示眼内MCP-1为局部产物，可能来源于眼内细胞，如视网膜色素上皮细胞和星形细胞［2］。
MCP-1对单核细胞和淋巴细胞具有化学趋化作用，能使大约30%的单核细胞发生迁移［1］。MCP-1也是单核细胞及巨噬细胞的强激活剂［2］。PVR和视网膜前膜的形成是眼内对损伤的一种炎症及修复反应。组织损伤和血管完整性及血眼屏障的破坏，刺激血小板释放血小板源性生长因子，在其诱导下，眼内细胞分泌MCP-1，单核巨噬细胞在MCP-1的作用下聚集到病变部位发挥组织修复与重建的重要作用［1］。这些聚集的细胞可分泌多种细胞因子及生长因子，这些生长因子又不断促进细胞增生使病变加重，形成恶性循环，导致PVR及视网膜前膜形成。
PDR的视网膜前膜也同样存在有MCP-1阳性细胞，此与国外检测玻璃体液中MCP-1结果一致。推测糖尿病视网膜病变中毛细血管周细胞丧失，微血管瘤形成，血视网膜屏障破坏，激活了细胞免疫系统及体液免疫系统。
由此可见，MCP-1参与PVR和PDR的形成，进一步研究趋化细胞因子的作用，可能提供这些疾病的免疫生理学的新知识，并可能提供治疗学的新途径。如有人报道，地塞米松能阻断白细胞介素-1诱导MCP-1表达［2］。
4 参考文献
[1] 黄晓红，综述.MCP-1及其在疾病发病中的作用.国外医学呼吸系统分册，1995，15：170-173.
[2] Abu El-Asrar AM,Van Damme JO,Put W,et al.Monocyto chemotactic protein-1 in proliferative vitreoretinal disordors.Am J Ophthalmol,1997,123:599-606.
[3] 曹景泰，武丽，张惠蓉，等.增殖性视网膜病变玻璃体切割物的细胞学及免疫组化研究.中华眼科杂志，1997，7：264-267. |
