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增生性视网膜前膜中单核细胞趋化蛋白-1的表达

http://www.cnophol.com 2009-7-7 10:30:55 中华眼科在线

  增生性视网膜前膜中单核细胞趋化蛋白-1的表达

  中华眼底病杂志 1999年第2期第15卷 增生性玻璃体视网膜病变研究

  作者:徐莉莉 曾水清 万光明 王玲丽

  单位:430022 武汉,同济医科大学附属协和医院眼科

  关键词: 视网膜;玻璃体视网膜病,增生性;糖尿病视网膜病;白细胞介素类

   中国图书资料分类法分类号 R774.5  R446

  近年研究表明,某些生长因子具有促进增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)和增生性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)形成的作用。单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)被确认是有趋化及活化单核巨噬细胞作用的一种趋化细胞因子[1]。已有报道[2]在PVR、PDR及黄斑裂孔患者玻璃体液中测出MCP-1,并证实其水平与增生程度有重要相关性。但尚未见到增生膜中有关MCP-1表达的报道。我们应用间接免疫荧光法对PVR及PDR的视网膜前膜中MCP-1的表达进行了观察,现将结果报道如下。

  1 资料和方法

  1.1 研究对象 12例标本为我科玻璃体切割术中取出的视网膜前膜增生组织(PVR为D2级以上),分别取自12例患者的12只眼,其中原发性视网膜脱离合并PVR、外伤性视网膜脱离合并PVR和PDR各4例,男性7例,女性5例,平均年龄34岁。

  1.2 试剂与方法 ①主要试剂:MCP-1标准品(Gibco公司),羊抗兔IgG/FITC(上海生物制品研究所)。②标本处理方法:玻璃体切割术中用眼内镊夹出前膜后,立即用4%甲醛固定,常规石蜡包埋,连续4 μm切片,贴于明胶载玻片上,常规脱蜡,0.5%胰蛋白酶消化20分钟,磷酸盐缓冲液(phosphate-buffer solution,PBS)洗3次,每片加第一抗体0.04 ml(多克隆兔抗人单核细胞趋化蛋白,1∶500稀释),湿盒4 ℃过夜,PBS洗3次,加荧光标记第二抗体0.04 ml(羊抗兔IgG/FITC,1∶20稀释),37 ℃湿盒避光孵育30分钟,PBS洗3次,甘油-PBS封片,Leito荧光显微镜观察及摄片。阴性对照:去一抗以PBS加二抗呈阴性[3],阳性细胞显示荧光为绿色,阴性对照片未见阳性细胞。

  2 结果

  12例标本增生膜呈浓而密的荧光,其间可见散在或密集的细胞,分布不均,数量不等,部分细胞的胞膜及胞浆呈现荧光表达,胞核呈暗黑色,阳性细胞的大小不一,呈圆形或不规则形,三组病例的阳性细胞在形态学表现上无明显差异。

  3 讨论

  有报道,在血浆的样本中未测出MCP-1,而在PVR、PDR、黄斑裂孔患眼的玻璃体液中已测出[2]。我们在PVR(包括外伤性)和PDR患眼的视网膜前膜均发现有MCP-1阳性细胞,提示眼内MCP-1为局部产物,可能来源于眼内细胞,如视网膜色素上皮细胞和星形细胞[2]。

  MCP-1对单核细胞和淋巴细胞具有化学趋化作用,能使大约30%的单核细胞发生迁移[1]。MCP-1也是单核细胞及巨噬细胞的强激活剂[2]。PVR和视网膜前膜的形成是眼内对损伤的一种炎症及修复反应。组织损伤和血管完整性及血眼屏障的破坏,刺激血小板释放血小板源性生长因子,在其诱导下,眼内细胞分泌MCP-1,单核巨噬细胞在MCP-1的作用下聚集到病变部位发挥组织修复与重建的重要作用[1]。这些聚集的细胞可分泌多种细胞因子及生长因子,这些生长因子又不断促进细胞增生使病变加重,形成恶性循环,导致PVR及视网膜前膜形成。

  PDR的视网膜前膜也同样存在有MCP-1阳性细胞,此与国外检测玻璃体液中MCP-1结果一致。推测糖尿病视网膜病变中毛细血管周细胞丧失,微血管瘤形成,血视网膜屏障破坏,激活了细胞免疫系统及体液免疫系统。

  由此可见,MCP-1参与PVR和PDR的形成,进一步研究趋化细胞因子的作用,可能提供这些疾病的免疫生理学的新知识,并可能提供治疗学的新途径。如有人报道,地塞米松能阻断白细胞介素-1诱导MCP-1表达[2]。

  4 参考文献

  [1] 黄晓红,综述.MCP-1及其在疾病发病中的作用.国外医学呼吸系统分册,1995,15:170-173.

  [2] Abu El-Asrar AM,Van Damme JO,Put W,et al.Monocyto chemotactic protein-1 in proliferative vitreoretinal disordors.Am J Ophthalmol,1997,123:599-606.

  [3] 曹景泰,武丽,张惠蓉,等.增殖性视网膜病变玻璃体切割物的细胞学及免疫组化研究.中华眼科杂志,1997,7:264-267.

(来源:互联网)(责编:xhhdm)

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