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Vogt-小柳原田综合征与HLA-DR4、DRw53相关的研究

http://www.cnophol.com 2009-7-13 11:10:43 中华眼科在线

Vogt-小柳原田综合征与HLA-DR4、DRw53相关的研究

眼视光学杂志 2000年第2期第2卷 论著

作者:黄祥坤 杨培增 周红颜 马翠萍 钟晖 陈玲 金浩丽 藉莉 谢楚芳 胡朝辉 陈盛强

单位:黄祥坤 杨培增 周红颜 马翠萍 钟晖 陈玲 金浩丽 藉莉 谢楚芳(中山医科大学中山眼科中心,广东 广州 510060);胡朝辉 陈盛强(广州医学院医学检验中心,广东 广州 510000)

关键词:Vogt-小柳原田综合征;免疫遗传;HLA-DR4抗原;HLA-DRw53抗原;对比研究

  [摘 要] 目的:探讨HLA-DR4、HLA-DRw53抗原与Vogt-小柳原田综合征的相关性。方法:用聚合酶链反应一系列引物法对61例Vogt-小柳原田综合征和102例健康人进行HLA-DR4、HLA-DRw53分型。结果:患者HLA-DR4、HLA-DRw53阳性率分别为45.90%和62.29%,正常对照组阳性率则分别为14.71%和38.24%,患者与正常对照组之间差异有显著性意义(P<0.05)。结论:Vogt-小柳原田综合征与HLA-DR4和HLA-DRw53有密切的相关性。

  [中图分类号] R773.9;R392.11  [文献标识码] A  [文章编号] 1008-1801(2000)02-0099-02

Association of Vogt-Koyanagi-Harada Syndrome with HLA-DR4、HLA-DRw53 in Chinese patients

HUANG Xiang-kun(Zhongshan Ophthalmic Center,Sun Yat-sen University of Medical Sciences,Guangzhou)

  yANG Pei-zeng(Zhongshan Ophthalmic Center,Sun Yat-sen University of Medical Sciences,Guangzhou)

  zHOU Hong-yan(Zhongshan Ophthalmic Center,Sun Yat-sen University of Medical Sciences,Guangzhou)

  Abstract: Objective:To investigate the association of Vogt-Koyanagi-Harada(VKH)Syndrome with HLA-DR4,HLA-DRw53 in Chinese patients.Methods:Polymerase chain reaction-sequence specific primer(PCR-SSP)was used for HLA-DR4,HLA-DRw53 typing in 61 patients with VKH syndrome and 102 healthy individuals.Results:The positive rate of both HLA-DR4(45.90%) and HLA-DRw53(62.29%) in patients with VKH syndrome was significantly higher than that in normal individuals(14.71% and 38.24% respectively).Conclusion:VKH syndrome is strongly associated with HLA-DR4 and HLA-DRw53 in Chinese patients.

  Key words: Vogt-Koyanagi-Harada Syndrome; immunogenetics; HLA-DR4 antigen; HLA-DRw53 antigen; comparative study

  Vogt-小柳原田综合征是一种肉芽肿性全葡萄膜炎,常伴有脑膜刺激征、听功能障碍、白癜风和毛发变白、脱发等改变。此病有明显的地域分布,多发于日本人和中国人[1]。已有研究发现,此病的发生中有免疫遗传因素参与[2]。我国学者发现此病与人类白细胞抗原(humanleukocyte antigen HLA)HLA-DR4、HLA-DRw53有明显的相关性[3,4],但目前尚缺乏大宗病例的研究报道。有鉴于此,我们探讨了Vogt-小柳原田综合征与HLA-DR4、DRw53的相关性。

  1 材料和方法

  Vogt-小柳原田综合征患者61例,汉族,均来自中山医科大学中山眼科中心葡萄膜炎专科门诊,患者来源于全国25个省市自治区。健康对照者102人,均系汉族。

  取受检者血,加入抗凝剂,用酚抽提法提取DNA,应用PCR-SSP(聚合酶链式反应-系列特异性引物)法检测HLA-DR4、DRw53。HLA-DR4上游引物序列为5'-GTTTCTTGGAGCAGGTTAAACA-3',下游引物序列为:①5'-CTGCACTGTGAAGCTCTCCAC-3',②5'-CTGCACTGTGAAGCTCTCCCA-3',扩增产物为260bp;HLA-DRw53的上游引物序列为5'-GATCGAGTGTGGAACCTGACA-3',下游引物序列为5'-CTGCACTGTGAAGCTCTCCCA-3',扩增产物为213bp;选择人类生长激素基因特异性引物为内对照,上游引物序列为:5'-GCCTTCCCAACCCCCTTA,下游引物序列为5'-TCACGGATTTCTGTTGTGTTT,扩增产物为429bp。以上引物均由加拿大真达科技贸易有限公司提供。PCR反应体系包括50~100ng基因DNA,多聚酶1U,DR4、DRw53特异性引物(0.5μmol)、200md-

  NTP和PCR缓冲液。实验过程中:95℃预先变性5min,在基因扩增仪上进行30个周期的热循环,3个温度条件分别是94℃ 30s,58℃ 40s、79℃ 60s。于2%琼脂糖凝胶上进行电泳20min,电压5V/cm,紫外灯下观察结果。

  2 结果

  Vogt-小柳原田综合征患者中HLA-DR4阳性率45.9%,HLA-DRw53阳性率为62.3%,而正常对照组阳性率分别为14.7%和38.2%,患者与对照组相比差异有显著性意义(见附表)。

  与对照组比: χ2=19.13,RR(相对危险率)=8.87,P<0.01, χ2=9.13,RR=2.63,P<0.05

  3 讨论

  Vogt-小柳原田综合征是我国葡萄膜炎中最常见的类型之一,其发病机制尚不完全清楚。目前的研究资料显示,感染、自身免疫及免疫遗传因素在其发病中均起着一定作用。有关遗传因素在此病中的作用国外已有多个报道,在美国患者中,此病中HLA-DQw3有密切的相关性,研究证实HLA-DQw3与HLA-DR4有阳性的联锁平衡关系[5];在希腊患者中,此病与HLA-DR1和HLA-DR4相关[6];在日本患者中,它与HLA-DR4、Bw54、Cw53、DR53、DQ4、Dw15、DQw4等多种抗原相关[1,7];我国学者研究发现,此病与HLA-DR4、DRw53相关[3,4],我们的资料也证实了此种相关性,发现HLA-DR4阳性的个体发生此病的可能性比阴性个体大近9倍,HLA-DRw53阳性个体发生此病的可能性比阴性者大近3倍。

  有关HLA-DR4、DRw53与Vogt-小柳原田综合征相关的机制目前尚不清楚,主要有以下几种观点[1]:①疾病的易感染基因或致病基因与特定的HLA抗原紧密连锁,因此不难理解为什么该抗原阳性个体易于患此种疾病;②免疫反应基因与一定的HLA抗原紧密连锁,使得此种抗原阳性的个体易于对一些致病性抗原发生免疫反应和发生此种疾病;③HLA抗原可以作为某些感染因子或化学物质的细胞表现受体而发挥作用;④HLA抗原与某些病原有相似性,可能通过引起交叉反应而诱导某种疾病。

  Vogt-小柳原田综合征患者的HLA分型不但可以了解疾病的免疫遗传背景,还可能对临床分型、推测患者的预后、并发症及对治疗的反应等有一定的帮助。目前我们正在分析比较HLA-DR4阳性与阴性、HLA-DRw53阳性与阴性患者之间在临床表现、病程及预后等方面的差异,期望藉此对临床诊治提供帮助。

  基金项目:国家杰出青年基金项目(39925034)、教育部优秀年轻教师基金、广东省自然科学基金项目(980114)和广东省重点科技攻关项目。

  作者简介:黄祥坤(1962-),男,广东梅州人,广州中山医科大学中山眼科中心主管技师,从事眼免疫基础应用研究。

  参考文献

  [1] 杨培增,李绍珍主编.葡萄膜炎[M].北京:人民卫生出版社,1998.311-334.

  [2] Rao NA,Inomata H,Moorthy RS. Vogt-Koyanagy-Harada Syndrome.In:Pepose JS,Hollard GN,Wilhelmus KR(eds). Ocular Infection and Immunity.St[M]. Louis:Mosby,1996.735-753.

  [3] 肖天林,蒋幼芹,游学科.人类白细胞抗原-DR4基因亚型与Vogt-Koyanagy-Harada综合征相关性研究[J].中华眼科杂志,1997,33:268-271.

  [4] 赵明,蒋幼芹.色素膜大脑炎的临床分析及其与人类白细胞抗原的关系[J].中华眼科杂志,1992,28:40-43.

  [5] Davis JL,Mittal KK,Freidlin V,et al.HLA associations and ancestry in Vogt-Koyanagy-Harada diseasa and sympathetic ophthalmia[J].Ophthalmology,1990,97:1137-1142.

  [6] Weisz JM,Holland GN,Roer LN, et al. An association between Vogt-Koyanagy-Harada Syndrome and HLA-DR1 and DR4 in Hispanic Patients living in Southern California[J].Ophthalmology,1995,102:1012-1017.

  [7] Islam SMM, Fujino Y, Hirata R, et al. HLA class Ⅱ genotypes in Vogt-Koyanagy-Harada disease. In:Nussenblatl RB, Whitcup SM, Caspi RR(eds). Advances in Ocular Immunology[M].Amsterdam:Elsevier,1994.335-338 .

(来源:互联网)(责编:xhhdm)

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