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3讨论
葡萄膜炎是一种器官特异性的自身免疫病，迄今为止其确切发病机制尚不明确。然而近来研究认为，免疫系统的异常活化，可能在葡萄膜炎的发生、发展过程中起着重要的作用。其中，T细胞在EAU中起着中心性的作用。实验研究表明，致葡萄膜炎T细胞群体的活性与其受抗原刺激后产生IFNγ的能力有关。在所分离的致敏T细胞群体中，具有产生IFN－γ的细胞具有致葡萄膜炎括性，反之亦然[6,7]。而细胞因子IL10、TGFβ也是介导EAU自然恢复的机制之一[8]。
而CD4+CD25highTreg作为一种具有免疫抑制作用的T细胞，能够抑制CD4+和CD8+T细胞的活化与增殖，可以抑制对自身抗原或外来抗原的异常免疫反应从而维持自身免疫平衡[9]。它已被证实在多种自身免疫病如类风湿性关节炎（RA）、溃疡性结肠炎[10]（IBD）等发病中具有重要作用。而且，一些研究表明CD4+CD25high调节T细胞可以通过分泌细胞因子(IL10，TGFβ)而介导抑制效应[11,12]。另外，Treg能特征性表达CTLA－4。体内实验证明，Treg表面CTLA4和APC表面的CD80/CD86结合，能诱导Treg的免疫抑制作用[13]。
在葡萄膜炎的发病中的作用，目前研究主要集中在实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎(experimental autoimmune uveoretinitis，EAU)动物模型中。有人发现，对EAU易感的B10.RIII鼠，用单抗去除CD25+细胞或者添加纯化的CD4+CD25high细胞后，用IRBP进行免疫。发现去除CD25+细胞后，鼠更早、更易且更严重地发生EAU，相反，补充CD4+CD25+ 细胞的鼠疾病评分降低[14]。Keino等[15]也发现将CD4+CD25+ T细胞过继转移给IRBP诱导的EAU小鼠后，这种调节T细胞能抑制IRBP致敏的T细胞增殖及IL2、IL5和IFN的分泌，从而抑制IRBP反应性T细胞的活化，能保护小鼠EAU发展并减轻EAU[16]，因此，补充调节T细胞可能对葡萄膜炎有治疗作用。但是，目前调节性T细胞其在葡萄膜炎患者发病中的作用还少有报道。
本实验中，我们采用细胞表面双色或三色荧光染色、流式细胞术分析的方法，检测了葡萄膜炎患者外周血中CD4+CD25high/CTLA4的表达情况。结果发现，葡萄膜炎患者外周血中CD4+CD25high的比例显著高于健康对照组，同时，与Treg细胞密切相关的CTLA4同样被发现在葡萄膜炎患者CD4+CD25high Treg细胞中高表达，初步提示CD4+CD25+ Treg也可能在葡萄膜炎的发病过程中发挥一定的作用。而且，CD4+CD25highT细胞表达同患者的疾病评分呈正相关性，即患者症状越严重，其比例也越高，提示葡萄膜炎患者中CD4+CD25+ Treg表达水平可作为一种对病情评价的指标。但在葡萄膜炎不同类型患者中对比发现，CD4+CD25highT细胞表达在全葡萄膜炎、前葡萄膜炎以及中后及后葡萄炎患者中表达无明显差异。因为葡萄膜炎发病机制及其病因非常复杂，在不同类型中可能其免疫机理各有不同，因此得出上述结果。
生理性CD4+CD25+ Treg细胞在正常机体内约占CD4+ T细胞的5%～l0%，其数量及活性足以抑制自身免疫性疾病的发生。而在炎性反应组织中，提呈自身抗原的APC活化后，具有有效的自身反应性及抗原敏感性的CD4+CD25+ Treg细胞迅速转移至炎性反应部位，与抗原呈递细胞（APC）结合后活化，反馈性的升高，从而发挥其功能，抑制转移至该组织的自身反应性CD4+CD25+ T细胞和CD4+ T细胞的功能，以达到抑制炎症的目的。毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA4）则是表达于T细胞上的与CD4+CD25+ Treg细胞相关的一个重要标志。作为负性调节分子，当T细胞活化时，CTLA4表达也反馈性的升高，以达到抑制T细胞过度活化、维持机体免疫平衡的目的。因此，在自身免疫病的患者中，往往检测到这些抑制作用的分子的异常升高。我们推测，葡萄膜炎患者外周血中CD4+CD25high 表达升高可能就属于这种反馈性的升高。但是，这种升高还不能够完全抑制活化的免疫反应，导致疾病发生。结合动物试验的结果提示，补充相关特异性CD4+CD25+ 调节T细胞可能对成为治疗葡萄膜炎的新途径，这都需要在今后的试验中进一步证实。
总之，本研究结果表明，在葡萄膜炎患者外周血中CD4+CD25+ Treg细胞的异常表达可能参与疾病的发生发展，并与疾病的活动密切相关。关于CD4+CD25+ Treg细胞的进一步研究，则有助于监测葡萄膜炎患者体内的细胞免疫状态，对探讨葡萄膜炎的新的治疗方法具有重要的意义。
【参考文献】
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