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2.3 Western blotting结果
结果显示GFAP为一分子质量约51kDa的单一蛋白条带（图4A）。与免疫组织化学结果相符合，术后2h术眼GFAP蛋白量改变不显著，直到术后3d，GFAP蛋白量的改变出现显著性差异，与假手术组相比增加至1.44±0.16倍，术后1wk增加至1.58±0.15倍，至术后3wk一直保持在较高水平（图4 A,B）。
3讨论
Müller细胞是视网膜中主要的神经胶质细胞，胞体位于内核层（INL），其细长的突起贯穿视网膜全层，足板与神经节细胞关系密切并构成内界膜。Müller细胞对维持视网膜正常功能起重要作用，在病理情况下会发生一系列反应[4]。它可识别多种神经信号，控制视网膜内K+, H+, Na+水平，维持内环境的稳定，调节神经递质如谷氨酸和GABA的浓度[5]。Müller细胞对神经元损伤、变性和再生所产生的一系列反应前面已有报道[512]。在这些情况下，Müller细胞会通过改变细胞骨架蛋白产物产生一系列胶质化反应[13]。正常情况下Müller细胞不表达GFAP[1,14]。GFAP是位于GCL和NFL的星形胶质细胞的标记物。在病理情况下，如缺血、慢性缺氧[15]、光损伤[16]、视网膜脱离[17]等情况下，可以在Müller细胞上诱导出强烈的GFAP的表达,眼压升高后我们在视网膜矢状位切片上明显地看到Müller细胞上出现GFAP的诱导表达，我们进一步用视网膜铺片的方法证明了这一点。有趣的是本身表达GFAP的星形胶质细胞针对眼压升高其GFAP的表达没有明显的改变。
Müller细胞对视网膜损伤这种高敏和早反应性可能具有视网膜保护作用，另一方面它也可能感受到周围微环境的改变而发出神经变性的信号。目前可以肯定的是GFAP在Müller细胞上的诱导表达是对视网膜损伤的一种反应性改变，其确切意义值得进一步探讨。GFAP是视网膜损伤一个潜在的非常有用的标记物，一是因为它作为中间丝蛋白的一种构成细胞骨架，非常容易识别。再者，视网膜损伤后，GFAP在Müller细胞上的诱导表达快速而且强烈，并且随病程进展出现波动。另外，值得注意的是同属于神经胶质细胞的星形胶质细胞在眼压升高后，其自身表达的GFAP无明显改变，可能的原因是星形胶质细胞与视网膜血管关系要比与神经节细胞的关系更密切一些[18,19]。Müller细胞的足板与神经节细胞的关系密切，参与神经递质的传递，因此它比星形胶质细胞更能感受到影响神经节细胞的一些因素[20,21]。
总之，我们实验的主要目的是探讨高眼压情况下Müller细胞的反应性改变。我们的实验结果显示眼压升高可以诱导Müller细胞表达GFAP，随病情进展，到术后3wk一直保持在较高水平，其机制和意义有待进一步探讨。GFAP可以作为视网膜损伤的有用的生物标记物用于基础研究。
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13 Kim IB, Kim KY, Joo CK, et al. Reaction of Müller cells after increased intraocular pressure in the rat retina. Exp Brain Res 1998;121:419424 上一页 [1] [2] |
