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3讨论
基质金属蛋白酶（MMP）是一簇由结缔组织细胞分泌并参与降解细胞外基质成分的含锌蛋白酶,其作用涉及许多正常的生理过程及一些重要疾病的发生,特别是与角膜溃疡的发生、发展及预后关系密切。
表1 MMP9阳性染色细胞数及灰度值（略）
aP<0. 05 vs对照组
角膜组织中MMP主要包括MMP1（胶原酶），MMP2(明胶酶A)，MMP3（基质溶解素）和MMP9（明胶酶B）。基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase9，MMP9）属于明胶酶类，因其主要作用底物为基底膜成分Ⅳ型胶原从而在基底膜降解疾病中引人注目。
本研究选定的真菌性角膜溃疡具有以下几个特点：(1)角膜溃疡是以角膜基质细胞外基质成分的大量降解丢失为特征，这将依赖相关的特异性酶的作用，这些特异性酶可能就是MMPs家族，每一种酶都对角膜ECM的不同成分起降解作用，从而形成角膜溃疡。(2)角膜上皮的不完全愈合或不愈合，导致角膜溃疡的进一步发展。(3)炎性细胞浸润。在溃疡区可见大量的炎性（中性）粒细胞浸润，当角膜受损区形成了阻止炎症细胞浸润的物理屏障时，溃疡即能趋向中止。
研究结果显示MMP9的基因表达在真菌性角膜溃疡组织中的表达显著高于正常人的角膜组织，这提示MMP9在真菌性角膜溃疡的形成过程中起着重要作用，这与Rohini等[3]的研究一致。
MMP9虽然与MMP2同属明胶酶，但两者不同，Matsubara等报道MMP2具有监督正常角膜功能的作用，催化降解偶尔受损的角膜胶原；角膜受损以后该酶主要参与角膜基质胶原的重建过程，以便恢复组织功能；MMP9的表达与基质胶原的重建无关，此酶主要是参与控制新合成的上皮基底膜。而且在对角膜溃疡的动物模型的研究表明，基质细胞外基质成分的大量降解是在上皮下的基底膜消失之后，MMP9在这一过程中可能起着主要作用，MMP9的过量表达导致了角膜上皮基底膜的降解，控制此酶的过量表达可能会成为阻止角膜溃疡进一步发展的一种有效措施。我们认为在真菌性角膜溃疡的溃疡初始阶段，MMP9的基因过量表达导致了角膜基底膜降解，从而使溃疡向更深的方向发展。
MMP9的来源至今尚无确定答案。目前已有动物研究表明，在角膜溃疡的发生过程中，至少有一部分MMP9是角膜本身的细胞所分泌的，角膜基质细胞在培养中可以分泌MMP9，为MMP9的重要来源之一，因此角膜成纤维细胞成为抑制角膜中MMP9表达的一个重要的切点。角膜上皮基底膜可以表达MMP9，但MMP9的表达只能从细胞或器官培养中发现。虽然在正常的小鼠角膜组织中可见MMP9的表达[4]，但在人正常的角膜中却无明显的MMP9的存在。而本研究的实验结果显示在人正常的角膜组织有MMP9的mRNA的存在。在各种致病因素的作用下MMP9的mRNA开始表达翻译成MMP9，从而诱导了角膜溃疡向深层发展。同时申家泉等[5]的研究结果显示在正常角膜组织中有MMP9的存在且主要定位于角膜上皮层，与本研究相一致。
MMP9在角膜受损的第2d即出现，并且明显的定位于受损组织的上皮及基质层，而且临床和动物试验观察发现角膜基质的溶解总是发生在基底膜的丧失之后，因此认为上皮基底膜的破坏是触发基质降解的前提，MMP9存在于修复角膜组织的上皮层，并且降解基底膜Ⅳ型胶原及所有类型变性胶原，因此认为局部细胞释放的MMP9是造成基底膜破坏的主要原因，从而认为MMP9在角膜溃疡的形成前是诱发上皮缺损的关键。杨燕宁等[6]的研究亦表明MMP9的表达趋向于角膜炎的较早阶段。
从MMP9的作用底物来分析，MMP9在角膜溃疡的濒临穿孔阶段亦起着重要作用。这主要是由于后弹力层中Ⅳ型胶原是主要的，而胶原酶对Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型胶原几乎没有水解能力，这更加显示了MMP9在角膜溃疡的发生、发展及最终导致角膜穿孔中的重要作用。不但如此，MMP9对Ⅰ、Ⅲ型胶原及弹性蛋白等亦有一定的降解作用。
总之，真菌性角膜溃疡组织中的MMP9的基因表达明显增强，从而使上皮基底膜破坏，溃疡侵入基质层；大量的中性粒细胞浸及其释放的各种蛋白酶、角膜自身细胞分泌的蛋白酶、真菌的毒性代谢产物等一起加速了溃疡的发展，同时MMP9对后弹力层的降解又进一步促使溃疡角膜濒临穿孔。但MMP9在真菌性角膜溃疡形成发展的不同阶段中的作用及定位表达、真菌性角膜溃疡中MMP9的细胞来源、正常角膜组织相关因子对MMP9 mRNA的作用机制、致病真菌在培养中的代谢产物对角膜溃疡的促动作用、真菌性角膜溃疡中可能存在的基质金属蛋白酶与MMP9的相互作用及相应的有效抑制剂的研究等需要进一步构建真菌性角膜溃疡的实验模型，作更深入的研究，深入了解各种细胞因子对MMPs及TIMPs的调节作用,寻找和利用胶原酶抑制剂,治疗MMPs过渡表达的疾病,可能是今后研究的重点和方向。
【参考文献】
1曾静，黄明汉，王科梅.真菌性角膜溃疡45例临床分析.国际眼科杂志2008;8(4):830831
2 Jusoh S, Omar E, Ravichandrnn M, et al. Fusarium sp in severe contact lens related fungal keratitis. Int J Ophthalmol(Guoji Yanke Zazhi) 2008;8(4):661669
3 Rohini G, Murugeswari P, Prajna NV, et al. Matrix metalloproteinases (MMP8, MMP9) and the tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMP1, TIMP2) in patients with fungal keratitis. Cornea 2007;26(2)207211
4杨燕宁，Dirk Bauer,刑怡桥，等.基质金属蛋白酶在实验性单纯疱疹性角膜炎中的分布表达.眼科研究 2003;21（5）：489492
5程育宏，申家泉.基质金属蛋白酶家族及细胞外基质金属蛋白酶诱导因子与常见眼内恶性肿瘤的关系.国际眼科杂志2008;8(6):12431245
6杨燕宁，Dirk Bauer,李海平，等.小鼠单疱病毒性角膜炎中基质金属蛋白酶的表达与活性研究.中华眼科杂志 2004;40（6）：395399 上一页 [1] [2] |
