3 结果
3.1 标准曲线
将IL-6标准品含量与测得的OD值用SPSS统计软件处理获得IL-6含量标准曲线(见图1),得出回归方程为:Y=1.9505+0.5967LnX(Y为OD值,Ln是以e为底的自然对数,X为IL-6浓 度)。 图1 IL-6含量标准曲线
3.2. ELISA双抗体夹心法检测IL-6的浓度
结果见表1、图2。Ct感染后36h、48h、60h细胞培养上清中IL-6的含量均显著高于相应的对照组(P<0.05),且随感染时间的延长IL-6含量显著地逐步增高(P<0.05)。 表1 沙眼衣原体感染McCoy细胞分泌IL-6 *与对照比较P<0.05,△与36h Ct组比较P<0.05,▲与48h Ct组比较P<0.05 图2 沙眼衣原体感染McCoy细胞分泌IL-6的ELISA检测结果
3 讨论
IL-6为具有广泛生物学效应的细胞因子,具有双向免疫调节作用,也是机体炎症反应和一系列病理生理过程的重要介质。近年研究表明,Ct的致病机制与机体的免疫防御和免疫病理过程有关。细菌的脂多糖、病毒RNA、感染产生的中介物质均能刺激感染细胞及免疫细胞产生IL-6。李海燕等报道,沙眼衣原体感染输卵管性不孕患者输卵管液中IL-6水平升高,IL-6水平与Ct的亚临床感
染或持续性感染状态密切相关 [3] 。本实验用双抗 体夹心法检测IL-6分泌水平,结果显示,Ct感染McCoy细胞引起IL-6分泌水平明显增高,与文献报道衣原体感染沙眼衣原体可促进体外培养的上皮细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞等分泌IL-6的结果类似 [1,2] 。提示Ct感染后诱导细胞产生的IL-6可能通过调节机体的免疫功能而参与Ct感染的致病过程,且可能影响Ct感染的状态。上述结果有待体内和临床实验进一步证实。
文献报道,Ct感染的Hela细胞培养上清中24h可检测到前炎症性细胞因子IL-8显著增加,72h后达高峰,3d后,IL-8分泌开始下降,可能与Ct繁殖周期48h~72h有关 [4] 。本实验结果显示,Ct感染的McCoy细胞在感染后24h分泌前炎症细胞因子IL-6的水平显著高于对照组,且呈时间依赖性。提示Ct感染的McCoy细胞分泌IL-6的水平也许与Ct的繁殖周期有关。本实验未检测衣原体感染72h及72h后IL-6的分泌水平,故有待于进一步研究阐明。
IL-6和TNF、IL-1、IL-8等多种细胞因子协同构成复杂的炎性细胞因子网络,参与多种炎症性疾病的病理过程 [5] 。有文献报道,Ct感染的U937细胞分泌IL-1β、IL-6、TNF-α等多种细胞因子 [6] ,可能沙眼衣原体感染的McCoy细胞还产生其他的细胞因子,具体产生那些细胞因子及其相互作用,有待进一步研究。
参考文献
[1] Rasmussen SJ,Eckmann L,Quayle AJ,et al.Secretion of proin-flammatory cytokines by epithelial cells in response to chlamydia infec-tion suggests a central role for epithelial cells in chlamydia pathogene-sis.J Clin Invest,1997,99(1):77.
[2] Netea MG,Selzman CH,Kullberg BJ,et al.Acellular compo-nents of Chlamydia pneumoniae stimulate cytokine production in human blood mononuclear cells.Eur J Immunol,2000,30(2):541.
[3] 李海燕,梁占光.沙眼衣原体感染输卵管性不孕患者输卵管液中肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的测定.中华妇产科杂志,2000,35(7):411.
[4] 余俊龙,余 平,李立新,等.沙眼衣原体感染诱导Hela细胞分泌IL-8和IL-10.湖南医科大学学报,2003,28(2):174.
[5] Old LJ.Tumor necrosis factor.polypeptide mediator network.Na-ture,1987,326:330.
[6] Rothermel CD,Scachter J,Lanrich P,et al.Chlamydia tra-chomatis induced production of interleukin-1by human monocyte.In-fect Immun,1989,57:2705. 上一页 [1] [2] |