作者:戴旭锋 温州医学院眼视光学院
目的:动物实验是视觉电生理研究的重要手段。在大鼠视网膜电图(electroretinogram,ERG)记录中研究人员习惯于使用人工泪液作为记录电极和角膜之间的导电液,经验显示人工泪液具有促进记录电极与角膜之间的导电性,降低干扰,减轻金属电极对角膜上皮的损伤等优点,在实验中经常存在人工泪液使用过量的情况。我们实验室在记录正常大鼠ERG时偶然发现人工泪液过量会引起视网膜电信号明显降低的现象,查阅国内外文献,未见有相关报道,因此上述影响因素也未引起科研人员的重视。本实验通过滴加不同量人工泪液,来证实其对ERG的影响。
方法:成年雄性SD大鼠24只,约8周龄,体重为250~300g,将实验动物随机分为3组,每组8只。大鼠暗适应2h,在暗红光下用5g/l托品酰胺散瞳,速眠新腹腔注射麻醉(0.8ml/kg)。麻醉生效后将动物固定于特制实验台,然后安放电极,记录电极为自制Ag-AgCl环状角膜电极,该电极置于右眼角巩膜缘,参考电极和接地电极为自制不锈钢针状电极,参考电极刺入右侧颊部皮下,接地电极置于尾部皮下。大鼠左眼用黑色眼罩严密遮盖。然后在右眼角膜中央滴加人工泪液-潇莱葳,各组使用量不同:第1组为干燥组(不滴人工泪液),第2组为适量组(角膜上滴加少量人工泪液,保持球结膜和睑结膜基本干燥),第3组为过量组(角膜上滴加大量人工泪液,使之充满整个结膜囊)。然后观察各组ERG记录情况,暗适应ERG的刺激强度为3.0 cds/m2,单次闪光刺激持续时间5ms,刺激之间间隔1min,通频带设置为1~100Hz。取ERG b波峰时和幅值作为观察指标。
结果:①人工泪液用量对ERG记录过程中基线的影响:干燥组中有6只大鼠干扰波较大,基线不稳定;人工泪液适量组8只大鼠和过量组中6只大鼠在记录过程中干扰小,基线较稳定;另外过量组中有2只大鼠存在波形阻滞情况。②人工泪液用量对ERG b波峰时的影响:干燥组为72.7±9.7ms,适量组69.8±8.2ms,过量组为69.4±9.5ms,上述3组在统计学上无显著差异(P≥0.05)。③人工泪液用量对ERG b波幅值的影响:干燥组和适量组无显著性差别,分别为989.2±116.0μV和1016.2±130.1μV,而过量组波幅值却明显降低,为735.2±97.5μV,与上述两组在统计学上具有显著差异(P<0.00)。
结论:实验动物视网膜电图记录中使用人工泪液可以降低干扰,但使用过量会影响ERG振幅大小,因此在动物实验中需要引起重视。 |