3 讨论
本实验通过制作光凝小梁网和烙闭巩膜上静脉两种青光眼模型,研究了不同原理导致的视网膜节细胞损伤,比较其损伤的不同,进而明确两种模型的优缺点。
本研究使用的是光凝小梁网形成慢性眼压升高,可以形成类似临床青光眼的高眼压,从实验结果可发现此法导致的高眼压可使视网膜节细胞显著减少,内丛状层厚度变薄,内核层和外核层无明显变化,非常符合临床青光眼的病理表现,本模型方法制作简单,实验周期短,是研究高眼压视神经损伤的理想模型。有学者[4,5]采用前房注射α糜蛋白酶等方法升高眼压,但在实验过程中眼压升高不易控制,操作困难,眼压升高持续时间短,较光凝小梁网法有明显缺点。该法炎症反应轻且持续时间短,以改变房水流出道导致眼压升高持续稳定[6]。高眼压导致的视网膜损伤的机制很多,其中以高压导致视网膜缺血和高压直接导致视网膜损伤为主。视网膜缺血后组织学变化与缺血的时间、程度及细胞的状态都有关系,所以在研究结果上有差异。一般在早期以水肿为主,晚期表现为细胞的变性、萎缩及死亡。视网膜缺血损伤的机制非常复杂,一般认为细胞内钙超载、兴奋性氨基酸中毒、细胞因子、自由基的损伤等多种因素参与了视网膜损伤的过程,其中自由基的连锁反应和细胞内钙超载是导致视网膜节细胞凋亡的关键[7~9]。高压直接导致的视网膜损伤主要是由于对视网膜节细胞轴突产生机械压迫,导致视网膜节细胞凋亡,其机制可能是视神经阻断后轴浆运输中断,细胞失去靶细胞分泌的下行神经微丝蛋白调节,使原癌基因表达发生变化,导致细胞凋亡,细胞数量减少[10]。有学者报道[11]培养的视网膜节细胞在高压下也可导致细胞的凋亡,其机制尚不明确。
本实验所用的另一种方法是烙闭巩膜上静脉,可阻断房水的引流,导致眼压升高,其导致视网膜的损伤机制与光凝小梁网导致视网膜损伤机制相似,也是由于视网膜缺血和视网膜节细胞轴浆运输阻断等。但此法导致的眼压升高不稳定且持续时间短,并且操作技术要求高,模型成功率低。从实验结果来看,使视网膜节细胞减少的数目更明显,而且内丛状层、内核层和外核层厚度均明显变薄,可见此法易导致视网膜全层损伤,可能是由于本方法的损伤和感染导致的。
两种方法比较,烙闭巩膜上静脉建立模型技术要求较高,且容易出现高眼压以外的原因导致视网膜损伤,本方法导致的眼压升高只能持续2周;光凝小梁网建立模型技术简单,感染轻,高眼压持续时间长且稳定。由此可见,光凝小梁网建立青光眼的模型是一种比较好的研究慢性青光眼机制的模型。
【参考文献】
[1] Hana L,Harry A.Translimbal laser photocoagulation to the trabecular meshwork as a model of glaucoma in rats[J].Invest Ophthalmol Vis Sci, 2002,43:402410.
[2] 凌志红,孙兴怀.上巩膜静脉结扎联合应用5Ftt建立大鼠慢性高眼压模型[J].中国实验动物学报,2006,141(3):172175.
[3] Li B. Effect of pneumatic suction ring placement on intraocular pressure in cats[J].Ophthalmic Res,2001,33:271275.
[4] Neufeld AH,Sawada A,Becker B.Inhibition of nitric oxide synthase 2 by aminoguanidine,provides neuroprotection of retinal ganglion cells in a rat model of chronic glaucoma[J].Proc Natl Acad Sci USA, 1999,96(17):99449948.
[5] Yucel I,Akar Y,Yucel G,et al.Effect of hypercholesterolemia on inducible nitric oxide synthase expression in a rat model of elevated in traocular pressure[J].Vision Res,2005,45(9):11071114.
[6] Gaasterland D,Kupfer C. Experimental Glaucoma in the Rhesus Monkey[J].Invest Ophthalmol , 1974 ,13 :455.
[7] BerkellaarM, Clarke DB, Wang YC, et al.Axotomy results in delayed death and apoptosis of retinal ganglion cells in adult rats[J].J Neurosci, 1994, 14(7): 43684374.
[8] Takahashi K,Lam Tr,Edwa DP,et al.Protective effects of flunarizine on ischemic injury in the rat retina[J].Arch Ophthalmol ,1992,10:862870.
[9] Osborne NN,Ugarte M,Chao M,et al.Neuroprotection in relation to retinal to glaucoma[J].Surv Ophthalmol,1999,43(Suppl 1):51025127.
[10] 蔡莉,惠延年,马吉献,等. 乳兔雪旺细胞对成兔视神经挫伤修复的作用[J].中华眼底病杂志, 2000, 16 (2) : 291293.
[11] 彭抿,彭清华,李建超,等.视网膜神经节细胞体外高压培养模型的建立[J].湖南中医学院学报,2006,26(4): 1113. 上一页 [1] [2] |