作者：安晶，郭群，顾永昊，李莉，闫果林，朱德生，施新猷，张作明

    physiological and biochemical data in model rats of congenital stationary night blindness

    AN Jing，GUO Qun，GU YongHao，LI Li，YAN GuoLin，ZHU DeSheng，SHI XinYou，ZHANG ZuoMing

    Department of Clinical Medicine, School of Aerospace Medicine, Fourth Military Medical University, Xian 710033, China

    【Abstract】  AIM: To determine the basic physiological and biochemical data in a natural occurring mutant rats of congenital stationary night blindness（CSNB）． METHODS: Forty CSNB rats in F11 and F12 (20 female and 20 male) and 5 SD rats, aged from 13 to 15 weeks, were examined by electroretinogram (ERG) technique to evaluate the inherited traits under anaesthesia. The blood was then collected from the abdominal vein in torrefied tubes to measure the biochemical parameters. Then heart, liver, spleen, lung, brain (cerebrum, cerebellum, brain stem), pituitary, kidney, adrenal gland and testicle were taken to weigh. RESULTS: There were significant differences in organ weight between two sexes in CSNB rat (P<0.05), except for spleen,adrenal gland, pituitary. The coefficients of organs were significantly higher in female CSNB rats than that of the male except for kidney (P<0.01). The GLU, CHO, ALB were higher, and ALT, AST, ALP, BUN, CRE, TG, TP were lower in female rats; the result of electrolyte was that K, Na and iCa were higher in the male, Cl was higher in female, but there were no significant differences between female and male in statistics (P>0.05).  CONCLUSION: The basic physiological and biochemical data of CSNB rat strain are in normal range. There are significant differences in some basic physiological and biochemical data between female and male CSNB rats, but not lots between CSNB rats and control SD rats. CSNB rat will become a new mutant model rat for researches on inherited retinal disease.

    【Keywords】  night blindness/congenital;  rat;  electroretinogram;  physiology;  biochemistry

    【摘要】  目的：对本实验室首先发现并培育的自发性先天性静止性夜盲(CSNB)大鼠的主要脏器及血液、生化指标进行检测. 方法：随机选取出生13～15 wk的第11，12代CSNB大鼠通过视网膜电图鉴定后，抽取静脉血进行血清生化相关指标的检测，并对其重要脏器进行准确称量. 结果： CSNB大鼠脏器质量在雌雄之间除脾脏、肾上腺、脑垂体外，其余均存在显著差异（P<0.05）；脏器系数大脑、小脑、脑干雌雄间存在非常显著差异（P<0.01）；生化指标葡萄糖、总胆固醇和白蛋白在雌性大于雄性，丙氨酸基转换酶、天门冬氨酸基转换酶、碱性磷酸酶、尿素氮、肌酐、甘油三酯和总蛋白在雌性小于雄性；血电解质K＋，Na＋，离子钙（iCa）在雄性大于雌性， 雌性的Cl-值高，但无差异. 结论： CSNB大鼠基本生理学和生物化学参数均在正常范围内，其中一些参数在CSNB大鼠性别之间存在差异,但是与正常对照SD大鼠之间只有个别参数有差异. CSNB大鼠为遗传性视网膜疾病的研究提供了一种新的突变模式动物品系.

    【关键词】 夜盲/先天性；大鼠；视网膜电图；生理学；生物化学

    0引言

    遗传性视网膜疾病是致盲的重要原因，目前缺乏有效的治疗手段. 模式动物是研究基因和蛋白功能的重要支撑条件，也是研究疾病防治和药物开发的重要手段. 目前，日本京都大学正在进行一项生物资源保存计划，与眼科相关的有6种. 美国Jackson实验室是目前世界上最大的突变小鼠库，该实验室先后发现16种自发性基因突变视网膜疾病模式小鼠［1］. 我们在实验中发现一种视网膜电图（ERG）异常大鼠，经遗传学和视觉电生理学鉴定，确定为一种类似人类先天性静止性夜盲（congenital stationary night blindness, CSNB）模式大鼠［2-3］，并已经近交繁育至14代. 为建立一种新的、具有我国自主知识产权的视网膜疾病模式动物品系，我们对该品系的大鼠基本生理学及生物化学参数进行了测量.

    1材料和方法

    1.1材料本实验室发现并培育至第11代及第12代出生的13~15 wk CSNB大鼠40只，雌雄各半，外眼检查正常，屈光间质清晰，眼底未见异常. 将动物置于屏障动物实验室内饲养，予以12 h明暗交替光照，不限食水，室温22℃～26℃. 正常同龄对照SD大鼠10只，雌雄各半（第四军医大学实验动物中心提供），在本实验室条件饲养1 wk后进行实验.  RETIport系统（Roland Consult, 德国）及银氯化银角膜电极(自制)；电子分析天平（1/10000，上海分析仪器厂）；全自动生化分析仪（autolab18，意大利）；自动电解质分析仪（DX685，上海讯达医用电子仪器厂）；常规手术器械，速眠新Ⅱ（军事医学科学院军事兽医研究所，批号：005013）等.

    1.2方法

    1.2.1视觉电生理学检测按文献［4］的方法，采用RETIport系统进行视杆细胞反应（rodERG）、最大混合反应（MaxERG）、振荡电位（OPs）、明适应视网膜电图（PhotERG）和闪烁光视网膜电图（FlickerERG）记录. 大鼠在实验前12 h予以暗适应后先进行暗适应视网膜电图记录，再进行10 min明适应后记录PhotERG和20 Hz FlickerERG. 观察MaxERG 的a,b波，OPs的O2波和20 Hz FlickerERG的P1波潜伏期和幅值的变化.

    1.2.2血液标本采集及检测将CSNB大鼠禁食禁水12 h，采用乙醚麻醉后开腹，于腹腔静脉抽取静脉血3 mL，将血液注入干燥管内，3000 r/min离心10 min，取血清用全自动生化分析仪测定血清天门冬氨酸基转换酶(GOT)、丙氨酸基转换酶(GPT)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、葡萄糖(GLU)、总胆固醇(CHO)、甘油三酯（TG）等指标. 经自动电解质分析仪测定K＋，Na＋，Cl－及离子钙（iCa）.

    1.2.3脏器质量检查将以上动物在取血后放血处死，并立即剖取脑、心、肺、肝、脾、肾、肾上腺、睾丸等脏器，用电子天平称其质量. 在心脏的大血管出入处剪断血管，在左右肺门处剪断支气管，在肾门处剪断血管，脑组织以大脑脚为界分开大脑、脑干，延髓终止于锥体交叉. 除去上述器官周围的脂肪、筋膜，用滤纸吸尽脏器表面的血液和水分后用分析天平称质量，将左右肺、左右肾、左右睾丸合并称其质量.

    1.2.4数据测量应用RETIport系统进行波形幅值和潜伏期的测量.

    统计学处理:所有数据均采用SPSS 10.0统计软件对数据进行independentsamples t检验，分析组间及两两差异.

    2结果

    2.1视觉电生理学检测CSNB大鼠rodERG和MaxERG的b波均未引出明显波形，MaxERG的a波幅值较SD大鼠低，潜伏期较SD大鼠延长(P<0.05)；CSNB大鼠的OPs波畸形，子波不明确，仅在正常大鼠O2波的位置上有一明确的阳性波，而正常大鼠一般可引出5个子波. 对SD大鼠的O2波与CSNB大鼠OPs波最高阳性波进行比较，后者波幅值较对照组显著降低(P<0.05)；PhotERG波幅降低，潜伏期延长；20 Hz FlickerERG的P1波幅值较对照组有非常显著性降低(P<0.01，表1，图1).表1SD大鼠和先天性静止性夜盲（CSNB）大鼠视网膜电图中部分参数的比较（略）

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