任胜卫 张峰 牛静宜 李长优 杨玲玲 张宏波 谢立信 王宜强
山东省眼科研究所 266071
目的:a、b和r-晶体蛋白在哺乳类动物角膜中的表达分布及初步探讨其在角膜中的功能。
方法:1.采用免疫组化方法:检测不同发育阶段C57/BL小鼠角膜内aA-晶体蛋白的表达分布;检测人的变性角膜、正常角膜环、原代培养的人胚胎角膜上皮细胞和成人角膜缘干细胞内aA、aB、b和r-晶体蛋白的表达分布。2.体外培养TKE2细胞,实验分6组:空白对照组、H2O2、CpG、hEGF、LPS和TGFb处理组,采用荧光定量PCR检测aA-晶体蛋白在个处理组的表达变化。
结果:1、C57/BL小鼠各发育阶段(胚胎期、出生0天、1W、2W、4W、2M、4M、8M),角膜内均有aA-晶体蛋白表达,人的变性角膜和正常角膜环均有aA、aB、b和r-晶体蛋白的表达分布,主要表达在角膜上皮;原代培养的人角膜上皮细胞P1、P2、P3代和成人角膜缘干细胞P1代均有aA、aB、b和r-晶体蛋白表达。2.与空白对照组相比,H2O2(200uM/ml)、hEGF(10ng/ml)和LPS(1ug/ml)处理组,aA-晶体蛋白的表达量均明显升高;而CpG(10ug/ml)和TGFb(1ng/ml)处理组,aA-晶体蛋白的表达变化不明显。
结论:a、b和r-晶体蛋白在哺乳类动物角膜中有表达;H2O2、hEGF和LPS能引起aA-晶体蛋白的表达量升高,而CpG和TGFb对aA-晶体蛋白的表达作用不明显。参照在晶状体透明性研究方面已有的理论,推测a、b和r-晶体蛋白可能在哺乳类动物角膜透明性的获得、维持或丧失等过程中发挥重要作用。
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