徐凤   葛红岩

哈尔滨医科大学附属第一临床医学院   150001

目的：建立一种改良的兔角膜细胞冻存和复苏的方法。

方法：兔角膜细胞消化培养。取第2代细胞分别进行传统和改良方法冻存，于冻存后的第2周、3个月、6个月、1年分别行传统和改良的复苏方法。用MTT法测细胞生长曲线，应用三因素分析统计方法评定不同冻存方法、不同复苏方法、不同复苏时间三因素单独和/或组合对细胞复苏率的影响。

结果：兔角膜细胞体外生长良好。培养细胞Vim单克隆抗体阳性。细胞的复苏率均受不同冻存方法和复苏方法单、双因素影响，不受复苏时间及与冻存和复苏方法单、双因素及三因素的影响。冻存复苏后生长曲线良好。

结论：改良后的兔角膜细胞冻存和复苏方法可使细胞保持最佳生物学特性，细胞的复苏率高，适合用于体外实验研究。