彭辉灿 刘照耀
南华大学附属第二医院 421001
目的:观察苦参碱在高糖环境下对人视网膜血管内皮细胞(human retinal endothelial cells,HREC)的增殖和凋亡及TGF-β1表达的影响,
方法:使用不同浓度的苦参碱作用于在高糖(25mmol/L)环境下培养的HREC,分别使用MTT法和流式细胞术观察其对细胞增殖和凋亡的影响。
结果:1.免疫细胞化学检测体外原代培养的HREC,Ⅷ因子相关抗原抗体染色,呈阳性染色;2.MTT比色法结果显示,用0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.4mg/ml的苦参碱处理HREC培养24h、48h、72h和96h,当苦参碱 0.1mg/ml以上时,与对照组中的高糖组比较有显著性差异(P<0.05),并且实验组中各组之间的两两比较也有显著性差异(P<0.05)。作用24h细胞增殖抑制率分别为随着浓度的逐渐提高,作用时间的增加,细胞存活率逐渐下降,而细胞抑制率逐渐升高;3.流式细胞术结果分析显示,当苦参碱浓度为0.1mg/ml时,HREC的凋亡率为18.74±2.74%,与高糖对照组有显著的差异性(P<0.05),而且各实验组之间也有显著的差异性(P<0.05);
结论:苦参碱在高糖培养的人视网膜血管内皮细胞的增殖有抑制作用,呈时间和剂量依赖性;并能诱导细胞的凋亡;通过酶联免疫吸附试验证实了苦参碱能下调细胞内TGF-β1的表达,也呈时间和剂量依赖性。 |