张静静 刘廷 董晓光 王宜强

　　山东省眼科研究所 山东省眼科医院 250021

　　目的：观察高糖对体外培养的人脐静脉内皮细胞株EA.hy926生物学特性的影响，探讨内皮间质转化(endothelial-mesenchymal transition，EndoMT)在增生性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy，PDR)中的作用机制。

　　方法：体外培养EA.hy 926，实验分为两组：(1)对照组：葡萄糖的浓度为25mmol/L;(2)高糖组：葡萄糖的浓度为50mmol/L。观察细胞形态变化，MTT法检测高糖对细胞增殖的影响，划痕实验和transwell小室研究细胞迁移能力的变化。免疫荧光检测内皮细胞标志蛋白(血管内皮钙黏蛋白和α-连环蛋白)、间质细胞标志蛋白(神经钙黏蛋白、波形蛋白、纤维连接蛋白和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA))、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和细胞转型调控因子Twist表达变化。RT-PCR检测VE-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白、VEGF和Twist表达变化。

　　结果：葡萄糖浓度增高后，细胞由铺路石样变为条梭形，细胞增殖受到抑制，细胞迁移能力增加，黏附连接被破坏，间质细胞标志蛋白表达增多，VEGF和Twist也表达增多。

　　结论：高糖可以使内皮细胞发生间质转化，增加细胞的迁移能力，促进新生血管和纤维膜的形成，这与VEGF和Twist表达增多有关。高糖诱导的EndoMT机制可能在PDR发病过程中发挥着重要的作用。