刘思伟 张俊霞

　　西安交通大学第一附属医院 710061

　　目的：建立牛眼小梁细胞体外培养体系，观察高浓度葡萄糖对小梁细胞的影响，研究高糖与开角型青光眼(POAG)以及糖尿病与POAG之间的关系，探讨糖尿病易患开角型青光眼的可能原因。

　　方法：以新鲜小牛眼为材料，分离并培养小梁细胞，用光学镜、电镜观察正常小梁细胞的形态。将传至第三代的小梁细胞制作成细胞悬液、计数并接种于培养板(或培养瓶)中，无血清培养24小时，让细胞同步化，随机分为4组，分别加入含不同葡萄糖浓度(5.5、15、25、35mmol/L)的DMEM培养液，培养7天后，应用倒置显微镜、透射电镜及免疫组织化学等方法观察小梁细胞的形态及超微结构变化;用MTT法和流式细胞仪检测不同浓度葡萄糖对牛眼小梁细胞增殖及凋亡的影响。

　　结果：在35mmol/L的浓度组中，小梁细胞形态及超微结构发生了明显变化。MTT结果示，在15、25mmol/L浓度组中，对牛眼小梁细胞的抑制率分别为4.4%、6.9%(p>0.05，vs对照组);在35mmol/L浓度组中，对牛眼小梁细胞的抑制率为57.5%(p<0.05，vs对照组)。流式细胞仪检测结果示，在15、25mmol/L浓度组细胞的凋亡率无明显差异，在35mmol/L浓度组中，牛眼小梁细胞的凋亡率明显增加(p<0.05)。

　　讨论：当糖尿病患的血糖超过一定浓度时，则导致POAG的发生发展。高糖通过对小梁细胞超微结构的改变以及增殖和凋亡过程的影响，导致小梁细胞功能下降，数量减少，使小梁网滤过功能下降，房水流出阻力增加，从而诱发POAG的发生发展。