邱庆华 李彩红 吴星伟
上海 200080
目的:探讨灵杞黄斑颗粒对兔视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用机制。
方法:酶消化法分离获取悬浮的细胞进行青紫蓝兔RPE细胞原代培养,外源性加入H2O2诱导RPE细胞凋亡制作氧化损伤模型,采用灌胃方式给中药,采取含药血清,加入氧化损伤细胞培养模型,测定SOD等抗氧化酶的活性以及MDA等的水平,并用 western blot方法检测caspase-3及bcl-xL蛋白表达的变化。
结果:与对照组比较,模型组与空白血清组RPE细胞MDA含量均明显增高(P<0.01);低剂量血清组MDA水平增高幅度较前减小,高剂量血清组更加减小。与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05)。与MDA水平呈现相反的变化,模型组与空白血清组RPE细胞SOD活性均明显降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);低剂量血清组和高剂量血清组SOD水平与模型组相比明显升高,且呈效量依赖关系(P<0.05)。对照组RPE细胞caspase-3蛋白低水平表达,H2O2模型组与空白血清组caspase-3蛋白表达显著增高,低剂量血清组caspase-3蛋白水平表达降低,高剂量血清组表达水平更加降低,但仍高于对照组。
结论:灵杞黄斑颗粒显著抑制氧化损伤后MDA水平的增高,上调SOD活性,说明其部分保护机制是清除自由基,减少组织内脂质过氧化产物,防止对细胞的继发性损伤。灵杞黄斑颗粒可能通过下调Caspase-3及上调Bcl-XL表达,抑制H2O2引起的兔RPE细胞凋亡的产生,从而起到保护作用。 |