【摘要】 目的：分析70例真菌性角膜炎早期临床诊断结果，评价共焦激光显微镜在真菌性角膜炎早期临床诊断中的应用价值。方法：用共焦激光角膜显微镜对临床拟诊为真菌性角膜炎的70例患者进行检查，同时行涂片检查真菌菌丝及培养查真菌菌落，对三组结果进行比较。结果：在70例患者中，根据病史、临床表现确诊为真菌性角膜炎，其中共焦激光角膜显微镜的确诊率为94%(66/70)，角膜刮片的确诊率为31%(22/70)，培养查真菌菌落确诊率为20%(14/70)。激光共焦角膜显微镜检查检出率高于角膜组织刮片(χ2=29.615，P<0.01)及真菌培养(χ2=39.433，P<0.01)检查。结论：共焦激光角膜显微镜是一种无创、快速、有效的活体检查方法，在真菌性角膜炎的早期诊断、治疗和研究中将起重要作用。
【关键词】 共焦激光角膜显微镜;角膜;真菌性角膜炎
Clinical analysis of early diagnosis of 70 cases of fungal keratitis
Yang Zheng, YiPing Qiao, XiBo Zhang, GuangRong Liao, ZhaoXia Huang
Eye Center, the Affiliated Hospital of Luzhou Medical College，Luzhou 646000, Sichuan Province, China
Abstract AIM: To analyze the early diagnosis of 70 cases of fungal keratitis and evaluate the application value of confocal laser corneal microscopy.METHODS: Confocal laser corneal microscopy, corneal tissue smears and fungal cultivation were performed on 70 patients of suspected fungal keratitis.The results were compared .RESULTS: Seventy patients were clinically diagnosed of fungal keratitis based on history, clinical signs. The positive rate of confocal laser corneal microscopy was 94% (66/70).The positive rate of corneal tissue smears was 31% (22/70).The positive rate of fungus cultivation was 20% (14/70). The positive rate of fungal keratitis detected by confocal laser corneal microscopy was higher than by corneal tissue smears (χ2=29.615,P<0.01) and fungal cultivation (χ2=39.433,P<0.01).CONCLUSION: Confocal laser corneal microscopy can be a noninvasive, rapid and effective imaging technique, and it is helpful in the early diagnosis ,treatment and study of fungal keratitis.
KEYWORDS: confocal laser corneal microscopy; cornea; fungal keratitis
0 引言
真菌性角膜炎是一种严重的致盲性眼病，近年来由于免疫制剂、激素、抗生素等药物的不合理应用以及诊断技术的提高,真菌性角膜炎发病率的逐年增高[1，2],同时常因早期诊断及治疗的不及时,导致严重并发症。早期快速的病因学诊断极其重要[3，4]，但同时亦是一个难题。传统的诊断主要依靠病史、临床体征和实验室检查，但因受取材部位、时机、方法的限制，实际阳性率较低，同时活体取材对角膜组织造成二次损伤，易导致病原菌的深部侵袭[3]。共焦激光角膜显微镜是新近发展起来的一种活体生物影像检查技术，其工作原理是使用共扼焦点技术，利用激光扫描对角膜组织进行三维空间与时间显示，将角膜病的临床检查提高到了细胞形态学水平[57]。我们希望比较共焦激光角膜显微镜这一生物影像技术与传统实验室检查方法在真菌性角膜炎早期病因学诊断中的特点，探讨共焦激光显微镜在真菌性角膜炎的早期诊断中的意义。
1 对象和方法
1.1 对象
200905/200912就诊于泸州医学院附属医院，根据临床特征和相关病史拟诊为真菌性角膜溃疡患者70例70眼。男46例，女24例;年龄32～75(平均47.6±15.6)岁，农村居民52例,无业居民12例，工人6例;确切植物外伤史52例、非植物异物伤史8例，其他原因10例。病程3d～3mo。来我院就诊前已经局部或全身使用抗细菌、抗真菌、抗病毒等药物治疗者65例，占总人数的93%，其中接受抗真菌药物治疗者仅1例(1%)，未接受任何治疗者4例(6%)。
1.2 方法
1.2.1 角膜组织涂片及真菌培养检查
盐酸奥布卡因4g/L角膜表面麻醉，角膜溃疡病灶边缘刮片送检，KOH湿片法光镜下查找真菌菌丝和孢子。同时沙氏琼脂于25℃温箱孵育培养，鉴定真菌菌种。
1.2.2 共焦激光角膜显微镜检查[2]
激光共焦显微镜为德国海德堡公司生产的及其操作软件系统。主要装置包括: 12V/100W的卤素光源,滤过器、水浸式物镜、高速数码相机、角膜显微适配器及组件等。激光光源为670nm,四种图像获取模式：(1)单幅图像;(2)纵向断层扫描;(3)动态连续扫描：扫描深度80μm，2μm /每幅×40幅;(4)断层平面动态扫描：10幅/s。水平与纵向分辨率为1μm, 放大倍率800×。视野380μm×380μm。4g/L倍诺喜滴眼液患者角膜表面麻醉，开睑器开睑，患者的下颌及前额固定于托架上，眼用凝胶(BAUSCH&LOMBComfort gel)涂于物镜表面后安置一次性接触物镜，调整镜头位置及焦距，扫描角膜各层图像，选取有价值、质量高的图片保存，HRT Rostock软件测量分析。
统计学分析：德国海德堡公司的Rostock 操作软件测量分析, 统计分析软件为SPSS 13.0，采用χ2检验，以P<0.05为有统计学意义。
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