2 结果
2.1 激光共焦显微镜下真菌性角膜炎影像特点
所有受检眼均表现出病灶区上皮层、基质层结构紊乱、神经异构,散在分布炎性细胞,菌丝图像特点:在相对较暗背景下强反光杂乱的丝样结构,边界清楚,多有分支。菌丝旁可有较强反光的真菌孢子(图13)。
2.2 激光共焦角膜显微镜检查、角膜组织刮片及真菌培养检查结果
拟诊为真菌性角膜溃疡患者70例中,激光共焦角膜显微镜下66例查到菌丝,检出率为94%,22例以KOH湿片法检查到不同形态的菌丝或孢子,真菌检出率为31%;真菌培养,14例发现真菌菌落,真菌检出率为20%。其中22例组织刮片呈阳性的病例,有1例为反复多次刮取组织送检方查出真菌及孢子。激光共焦角膜显微镜检查检出率高于角膜组织刮片(χ2=29.615,P<0.01)及真菌培养(χ2=39.433,P<0.01)检查。
3 讨论
真菌性角膜炎是一种高致盲率的眼病,在农村劳动人群中具有较高发病率,早期诊断和及时治疗该病对保存患者有效视力极为关键。真菌性角膜炎早期病因学诊断一直是一个难题。传统的诊断主要依靠病史、临床体征和实验室检查,但因受取材部位、时机、方法的限制,实际阳性率较低,同时活体取材对角膜组织造成二次损伤,加重真菌深部侵袭,在实际临床工作中对早期诊断及治疗不利。
共焦激光角膜显微镜是利用激光扫描对角膜三维扫描,并可动态扫描成像的活体生物影像技术,激光扫描穿透能力强,干扰小,定位精确,可提供高清晰度和高放大倍率的角膜细胞层面的图像,直观显示活体角膜各层结构和各种细胞成分的形态,将角膜病的临床检查提高到了细胞形态学水平[5,6],具有快速、安全、敏感的特点,优于以往的刮片染色诊断手段,但由于设备价格昂贵,在我国尚未普遍开展。
我院在新引进激光共焦显微镜后,对35例临床诊断真菌性角膜炎患者进行角膜组织取材涂片培养及共焦激光角膜显微镜检查分析,其中涂片真菌11例,检出率为31%;培养检出真菌菌落7例,检出率为20%。而通过共焦激光角膜显微镜一次性查到确切真菌菌丝达33例,检出率为94%,略低于谢立信等[7]报道的96.9%。在3种检查方法中真菌培养的阳性率最低,其中3例组织刮片呈阳性的病例,有1例为反复多次刮取组织送检方查出真菌感染。共焦激光角膜显微镜阳性率远远高于实验室涂片和真菌培养检查。
由于激光扫描穿透能力强,干扰小,定位精确,共焦激光角膜显微镜较普通光源的共焦显微镜清晰度更高,通过动态观察角膜组织中的菌丝和孢子,对角膜无损伤、检查快速、范围全面、真菌性角膜溃疡的诊断阳性率提高,能弥补临床实际工作中微生物学检查的不足,不易漏诊,在真菌性角膜炎早期的病因学诊断中能快速准确作出定性诊断,对于早期诊断及治疗有着重要意义。但另一方面,角膜病灶面积、深浅、严重程度以及患者配合、检查者经检验均在一定程度上影响扫描图像质量,不利观察,造成漏诊。虽有文献报道,通过激光共焦显微镜在活体角膜上识别菌丝来检测出镰孢菌属,可以帮助诊断真菌性角膜炎[8,9]。但基于影像资料在真菌菌属鉴定方面尚不成熟,实验室真菌培养仍是诊断真菌感染的金标准。
因此初步对比激光共焦显微镜与传统实验室微生物学检查手段在真菌性角膜炎诊断中的特点,激光共焦显微镜具无创伤、实时、快速、高清晰、可重复、较大提高真菌性角膜炎的诊断阳性率,可弥补临床实际工作中微生物学检查的局限,对真菌性角膜炎的早期诊断与早期及时针对性治疗提供依据,赢得了真菌性角膜炎治疗的宝贵时机,同时也可避免盲目的抗感染治疗。当然涂片与培养的诊断阳性率虽然较低,对于激光共焦显微镜未能确诊部分病例,更应重视涂片与培养检查,且真菌培养在菌属的鉴定方面值得重视。
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