1  材料和方法

    1.1  标本来源

    共收集本院11 例初发性翼状胬肉（均为进展期）和9例复发性翼状胬肉患者的手术标本，其中男性 13 例，女性 7例，年龄 32～61岁。所有标本取得患者的同意。正常结膜4 例，取自猝死尸体，均在死后 12 h内获取。取得标本后立即用甲醛固定并用石蜡包埋。

    1.2  主要试剂

    小鼠抗人SDF-1单克隆抗体，小鼠抗人CXCR4单克隆抗体 (购自R&D公司)。免疫组化SP试剂盒，DAB显色剂，中性树胶（以上试剂均由中山公司提供）。

    1.3  免疫组织化学Envision法检测大鼠角膜SDF-1及其受体CXCR4的表达

    石蜡标本行4 μm厚连续切片，切片行常规二甲苯脱蜡，梯度酒精复水。用3%过氧化氢-甲醇溶液处理切片15~30 min，PBS缓冲液洗涤5 min，共3次。在柠檬酸盐缓冲液中微波修复抗原，中高火，5 min，共2次，自然冷却。用PBS缓冲液漂洗。甩干PBS，用正常山羊血清在室温孵育15~30 min，以封闭组织中非特异性抗原。甩去多余血清，加小鼠抗人SDF-1及小鼠抗人 CXCR4单克隆抗体（工作液浓度均为20 μg/ml），PBS代替一抗为阴性对照。置入湿盒于4℃冰箱孵育18 h。PBS缓冲液充分洗涤，去除切片上非特异性吸附抗体。甩干PBS，加入生物素标记的二抗工作液，置湿盒内37℃孵育30 min，用PBS洗涤5 min，共3次。甩干PBS，滴加辣根过氧化物酶标记链霉卵白素，置湿盒内37℃孵育30 min，PBS洗涤5 min，共3次。DAB显色，苏木素复染。梯度酒精脱水，二甲苯透明，晾干后中性树胶封片。光镜下观察照相。

    2  结果

    4例正常结膜组织的SDF-1及其受体CXCR4仅表达于基底部上皮细胞，位于胞浆中，表现为胞浆及胞膜呈棕黄色。上皮下组织未检测到二者表达。

    胬肉组织中有17例全层上皮细胞均呈棕黄色，即都有SDF-1及其受体CXCR4的表达，CXCR4的蛋白表达也见于胬肉纤维血管中浸润的炎性细胞、血管内皮细胞中，其胞浆及胞膜呈棕黄色颗粒。3例初发性翼状胬肉表达方式与正常结膜相似。

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