中华眼科杂志 1999年第2期第35卷 白内障

作者：胡楠　邱孝芝　龚启荣　管怀进

单位：226001 江苏南通医学院附属医院眼科(胡楠、龚启荣、管怀进)；上海医科大学附属眼耳鼻喉科医院眼科(邱孝芝)

关键词：干扰素类Ⅰ型；干扰素类Ⅱ型；晶体；上皮细胞

　　【摘要】　目的　研究α-干扰素(α-interferon，α-IFN)和γ-干扰素(γ-IFN)对体外培养的兔晶体上皮细胞生长的抑制作用及有效药物浓度。方法　取第2、3代传代培养的晶体上皮细胞做药物抑制试验。在培养皿中加入不同浓度的α-IFN和γ-IFN药物作用24小时和72小时后，用细胞计数法和MTT比色测定法确定药物对兔晶体上皮细胞增殖的抑制作用。结果　α-IFN和γ-IFN在10³～10⁴ IU/ml浓度能抑制兔晶体上皮细胞的生长，γ-IFN的抑制作用略强于α-IFN。结论　该结果可为临床筛选防治后发性白内障的药物提供依据。

　　An experimental investigation of inhibition of interferon on lens epithelial cell growth in vitro　　HU Nan, QIU Xiaozhi, GONG Qirong, et al. Department of Ophthalmology, The Affiliated Hospital of Nantong Medical College, Nantong 226001

　　【Abstract】　Objective　To investigate the inhibition of α-interferon (α-IFN) and γ-interferon (γ-IFN) on rabbit lens epithelial cell (RLEC) proliferation in vitro and their effective concentrations.Methods　The second and third passage of RLEC were used for assay. Various concentrations of α-IFN or γ-IFN were added into the culture medium and RLECs were exposed to these drugs. After 24 and 72 hours, the inhibition of RLECs was determined by counting the RLEC numbers on a counting plate and MTT colorimetric assay.Results　α-IFN and γ-IFN may reduce the proliferation of RLECs at the concentration of 10³～10⁴ IU/ml. The inhibition of γ-IFN was a little stronger than that of α-IFN.Conclusion　The experiment provides a scientific basis for selection of drugs to prevent after cataract.

　　【Key words】　Interferon type Ⅰ　　Interferon type Ⅱ　　Lens　　Epithalial cells

　　现代白内障囊外摘除术后，后囊混浊是影响术后视功能恢复的主要障碍之一。后囊混浊是因术中残留的晶体上皮细胞增殖和变性纤维化所致^［1］，尽管混浊的后囊膜可以通过再次手术或激光的方法去除，但这会破坏晶体后囊的屏障作用，增加视网膜脱离、黄斑囊样水肿等并发症的发生率。如能用药物抑制晶体上皮细胞的增殖，则能预防后囊混浊的发生。干扰素(interferon，IFN)，是病毒侵入机体后诱导产生的一种低分子糖蛋白，除具有抗病毒繁殖作用以外，还能抑制纤维化反应的多个环节。我们在体外培养的兔晶体上皮细胞中加入α-干扰素(α-IFN)和γ-干扰素(γ-IFN)，观察它们对晶体上皮细胞增殖的作用，以了解干扰素对预防后囊混浊的意义。

　　材料和方法

　　一、细胞培养

　　取成年家兔晶体前囊膜，用含15%胎牛血清的1640培养液(美国Sigma公司)进行植块培养和传代。

　　二、药物抑制试验

　　1.细胞计数法：取第2或第3代晶体上皮细胞，用0.25%胰蛋白酶消化后，按5×10⁵个/ml的浓度将晶体上皮细胞接种到24孔培养板上，加入培养液后置入培养箱中。24小时后细胞贴壁，分别加入用培养液稀释的α-IFN(卫生部成都生物制品研究所)，γ-IFN(上海克隆生物高技术有限公司)。α-IFN和γ-IFN的浓度分别为10 IU/ml、10² IU/ml、10³ IU/ml、10⁴ IU/ml，每个药物剂量设置3孔，同时设置对照组。加药后继续培养，作用24小时和72小时后分别取出，用胰酶消化，制成细胞悬液，细胞计数板上计数，计算各孔的细胞数，取各组的平均值。

　　2.MTT测定法^［2］：取第2、3代晶体上皮细胞，消化后按1×10⁵个/ml浓度接种于96孔培养板，每孔注入100 μl，培养24小时后取出加药。药物及浓度与细胞计数法相同，但每个药物浓度设置6孔。加药作用后3天，每孔加入MTT 10 μl，37℃培养箱中培养4小时，然后加0.04 mol/L盐酸异丙醇100 μl/孔，室温下静置数分钟后进行比色测定，测定仪为DG 3022 A型酶联免疫检测仪，波长为570 nm。

　　三、统计学方法

　　采用t检验。

[1] [2] [3] 下一页