3讨论

     视网膜对缺氧极其敏感，缺氧能造成许多眼底疾病如糖尿病性视网膜病变[1]，视网膜中央静脉阻塞(缺血型) ,视网膜中央动脉阻塞等,而细胞内氧的消耗主要功能是被细胞内线粒体的氧化磷酸化的过程所利用[2],而且约10 %～15 %的细胞内一些酶的活动也需要氧分子参加，所以缺氧不仅导致细胞内线粒体氧化磷酸化的抑制，同时也将抑制细胞内一些需要氧的正常反应代谢过程。

     HIF-1是在缺氧诱导的细胞核提取物中发现的一种DNA 结合蛋白，是被公认的缺氧调节中的重要因子。HIF-1是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种异源二聚体核转录因子，由α亚基(HIF-1α)和β亚基 (HIF-1β)组成。HIF-1α是唯一的Ｏ2调节亚单位，决定HIF -1α的活性， 通过对VEGF 等下游基因的调节而产生一系列代偿反应，以适应低氧环境[3-5]。在常氧情况下HIF-1α半衰期小于1min，通过泛素、蛋白酶体途径降解，缺氧降低泛素化或通过突变阻断泛素化而增加HIF-1α的表达。HIF-1α与缺氧诱导因子抑制因子结合，而被降解；缺氧条件下，由于降解通路被阻断，HIF-1α迅速与HIF-1β聚合形成有活性的HIF-1 二聚体，从而调节下游基因的表达。我们的研究发现，缺氧可以明显增加大鼠视网膜神经细胞HIF-1蛋白的表达[6 ] 。并调控它的下游基因P53的表达，从本实验看随着HIF-1α的表达达到高峰后P53的表达达到高峰，两者呈明显正相关.

     HIF-1α是机体生存必需的维持氧稳态的主要调节因子。从胚胎发育早期到成年期一直到衰老，HIF-1α精细地调节着许多生物反应。HIF-1α是机体生存必需的维持氧稳态的主要调节因子[7,8]。有研究表明氧浓度的改变，可以直接调控HIF-1α的活性，最近又发现MDM2泛素蛋白连接酶的识别靶标P53也能与HIF-1α亚基结合，从而介导HIF-1α亚基的降解。由于缺氧细胞中P53的表达升高，这样即可避免HIF-1α亚基在缺氧条件下的过量积累[9]，又可激活结构域结合蛋白1，直接与HIF-1α亚基结合,抑制P53与HIF-1α亚基的结合，从而抑制P53对HIF-1α亚基稳定性的负调节,增加ＨＩＦ-1α亚基的表达[10,11]。这样P53与Jab1协同调节缺氧条件下HIF-1α亚基的表达，有效地避免了HIF-1α亚基的过量表达。从本实验看随着P53的表达达到高峰HIF-1α的表达逐渐降低，同以上观点相符。由此可见P53和HIF-1α之间有着微妙的关系。

     缺氧是P53最强的生理性诱导剂,缺氧情况下,去磷酸化的HIF-1α通过与P53结合可介导缺氧情况下P53依赖的凋亡[9]。P53也参加了HIF-1α的调节。本研究结果支持这一观点。HIF-1α的表达与P53蛋白表达之间呈显著正相关(ｒ=0.902495)。该结果提示HIF-1α和P53可能协同参与了缺氧对视网膜神经细胞的调节,缺氧一方面使HIF-1α表达增加,提高视网膜能量代谢和血管生成,另一方面可能通过对P53的选择,使视网膜神经细胞发生凋亡。通过电镜可见凋亡高峰的出现同P53表达高峰的出现相符合。

    本实验只是对HIF-1α和P53的一个粗浅的研究，更深更细的研究有待于下一步进行。

   【参考文献】

1李媛,卢燕.糖尿病视网膜病变早期发病机制研究进展.国际眼科杂志,2005;5(4):750-754

2 Luo X, Lambrou GN, Sahel JA, Hicks D. Hypoglycemia induced general neuroal death whereas hypoxia and glutamate transport blockade lead to selective retinal ganglion cell death in vitro . Invest Ophthalmol Vis Sci ,2001;42(11):2695-2705

3 Ren XQ, Meng JM, Fu KD. Study on relationship between expression of p53, H IF-1α and angiogengesis of colorectal carcinoma. Zhongguo Yixue Gongcheng ,2004;12(4):31-35

4 Semenza GL. Expression of hypoxia inducible factor-1α echanisms and consequences. Biochem Pharmacology ,2000;59:47-53

5宋虎平,惠延年,王丽丽,韩晓霞,王海燕.缺氧诱导因子-1α在早期糖尿病大鼠角膜上皮细胞中的表达.国际眼科杂志,2006;6(2):352-356

6张红,栾洁.眼内新生血管与细胞因子.国际眼科杂志,2006;6(1):158-163

7 Kallio PJ, WilsonWJ, O’Brien S,Makino Y, Poellinger L. Regulation of the hypoxia inducible transcription factor 1 alpha by the ubiquitin proteasome pathway. J Biol Chem ,1999;274: 6519-6525

8 Semenza GL. H IF-1α, and the 3 PHDs: how animal cells signal hypoxia to the nucleus. Cell ,2001;107:123

9 Rudzinski M, Wong TP, Saragovi HU. Changes in retinal expression of neurotrophins and neurotrophin receptors induced by ocular hypertension. J Neurobiol ,2004;58(3):341-354

10 Vannucci RC, Towfighi J, Vannucci SJ. Hypoxic preconditioning and hypoxic—ischemic brain damage in the immature rat: pathologic and metabolic correlates. J Neurochem ,1998;71:1215

11苟琳,张作明,郭守一,张萍,李丽,郭群.缺氧对视网膜Müller 细胞超微结构及GFAP 表达的影响.第四军医大学学报,2002;23(5):472-475

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