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3 讨 论
ES是1997年于小鼠血管内皮细胞瘤的培养上清中发现的，后证实是由体内XVIII型胶原在组织蛋白酶或金属蛋白酶作用下，其羧基末段被分解出的一段大小为20?kD的片段［1］。ES是目前公认的最强的新生血管抑制剂，可以特异性作用于血管内皮细胞，抑制其增殖和移行，从而抑制新生血管生长。
近年来多肽、蛋白质作为药物，已越来越多地应用于临床。但是蛋白质具有抗原性，且有的蛋白质由于在体内半衰期短、生物利用度低而达不到治疗作用。化学修饰能够赋予蛋白质和多肽类药物许多优良性能，如免疫原性降低或消失，毒副作用减少，半衰期延长，物理、化学和生物稳定性增强等。基于内皮抑素的作用机制及肝素的生物学特性，内皮抑素既对内皮细胞有亲和作用又具有肝素的特异性结合位点［5］，故本研究采用LMWH对ES进行结构修饰。
我们利用LMWH成功的对内皮抑素进行了化学修饰，获得了理想的内皮抑素修饰物，其在25?℃和37?℃时的稳定性及活性保留百分率明显优于内皮抑素，表明低分子肝素化后的内皮抑素稳定性得到增强，在不明显影响其活性的前提下，其最佳修饰反应的时间为48?h。
角膜CNV是由角膜缘血管网形成的新生毛细血管逐渐侵入角膜而形成，与血管内皮细胞的增殖密切相关［6］。本实验采用碱烧伤法诱导角膜新生血管的形成［7］，该模型非常逼真地再现了角膜碱烧伤的病理状态，是研究炎症性新生血管发生机制和治疗的重要手段，且此模型操作简便，便于观察和比较新生血管生长状况。
将LMWHES用于治疗碱烧伤诱导的角膜新生血管，结果表明它可明显抑制CNV的增生，主要表现为CNV生长速度减慢，生长面积较少，与内皮抑素组及生理盐水对照组相比，有统计学差异（P<0.05）。组织病理学结果显示LMWHES组只在浅基质层内见少量新生毛细血管、管腔较小、分布稀疏，与内皮抑素组及对照组比较新生血管数量明显减少，VEGF的表达也明显低于上述二组。
本研究表明，内皮抑素经过低分子肝素修饰后，热稳定性增强，抑制兔眼角膜新生血管的作用优于内皮抑素。
【参考文献】
［1］ 〖ZK(#]O′reilly M S, Boehm T, Folkman J, et al. Endostatin:an endogenous inhibitor of angiognesis and tumor growth［J］. Cell, 1997, 88（2）:277285.
［2］ Robert B M,George K A. Serotonergic facilitation of facial motoneuron excitation［J］. Brain Res, 1979, 169:1127.
［3］ Feng J, Cai X, Zhao J H, et al. Serotonin receptors modulate CABAA receptor channels through activation of anchored protein kinase C in prefrontal cortical［J］. J Neurosci, 2001, 21（17）:6502.
［4］ 王晓燕，孙汶生，马春红，等. 重组人分泌型endostatin的纯化及其抑癌活性探讨［J］.中国肿瘤临床，2003,30（2）：136139.
［5］ Kreuger J, Matsumoto T, Vanwildemeersch M, et al. Role of heparan sulfate domain organization in endostatin inhibition of endothelial cell function［J］. EMBO J, 2002, 21(23):63036311.
［6］ Chang J H, Gabison E E, Kato T, et al. Corneal neovascurization［J］. Curr Opin Ophthalmol， 2001,12（4）:242249.
［7］ 邱培瑾.角膜新生血管的动物模型［J］.国外医学眼科学分册，2000, 24: 360363. 上一页 [1] [2] |
