李悦 蔡季平 马晓晔 程金伟 魏锐利

上海第二军医大学附属长征医院眼科 上海 200003

目的 探讨不同类型囊泡膜和质膜谷氨酸转运体在小鼠视网膜急性损伤后的表达变化及其可能性作用。

方法 C57BL/6小鼠78只，随机分为3组：正常对  照组6只、实验对照组36只（玻璃体内注射生理盐水）、实验组36只（玻璃体内注射谷氨酸）。分别于注射后0.5 h、3 h、6 h、12 h、24 h、72 h各处死6只。其中3只鼠的眼球用于冰冻切片，以免疫细胞化学法检测各时间点视网膜内I型和II型囊泡膜谷氨酸转运体（VGluT1和VGluT2）及三种质膜谷氨酸转运体：谷氨酸/天门冬氨酸转运体（GLAST）、谷氨酸转运体-1（GLT-1）及兴奋性谷氨酸转运体-1（EAAC-1）的表达情况。另外3只鼠的眼球用于 RNA抽提，以半定量RT-PCR检测各谷氨酸转运体mRNA的水平变化。

结果 与实验对照组相比，实验组小鼠视网膜兴奋性损伤12 h内，VGluT1和VGluT2的表达水平和分布情况均未看到明显变化； 24 h?72 h，虽然VGluT1的表达仍未发生改变，但VGluT2却明显地减少。GLAST 、GLT-1及 EAAC-1的表达在谷氨酸损伤3 h?12 h均有明显增高，但在24 h?72 h它们的表达水平开始逐渐降低。半定量RT-PCR结果与免疫细胞化学结果一致。

结论 视网膜急性损伤12 h内囊泡膜谷氨酸转运体表达没有发生变化，而质膜谷氨酸转运体表达明显升高。因此，在视网膜急性损伤期，很有可能是质膜谷氨酸转运体，而不是囊泡膜谷氨酸转运体对稳定突触间谷氨酸浓度起到重要作用。