|
1.2方法 受检眼用4g/L盐酸奥布卡因(倍诺喜,日本参天制药株式会社)表面麻醉1次,并滴用Vidisic眼凝胶(美国博士伦公司生产) ，调整操纵台高度和CCD摄像头位置,滴1大滴Vidisic眼凝胶于物镜头表面,盖上一次性无菌的角膜接触帽。受检者下颌和前额分别固定于下颌托与前额托上，令受试者平视前方，调整物镜位置，使角膜接触帽与角膜中央轻微接触，预设置两者接触的焦平面深度为0μm。转动焦平面调节环以获得角膜不同深度不同层次的图像。Z轴向后40幅图像动态连续扫描，每幅图像间隔1.5μm，同一断层平面动态连续记录图像10幅/秒。检查结束后，选取有价值的图像存盘。检查另一眼需换用新的无菌帽。
统计学分析:用Rostock操作软件进行细胞计数,数据统计用均数±标准差(±s)表示。所有数据使用统计软件SPSS 13.0进行统计学处理，不同年龄组细胞平均密度数值之间的比较用ANOVA方差分析比较，以P<0.05作为差异有统计学意义的标准。
2结果
2.1角膜组织学结构 (1)上皮层:总体上，上皮细胞层细胞较其它细胞的体积小，数量多（图1）。表层细胞排列紧密，大小较一致，但形状可有不同，细胞核较小。随深度的加深，细胞体积逐渐减少，同一深度扫描可见细胞核出现频率增加，排列疏松。基底层细胞体积最小，细胞核表现明显，呈现出明暗相间形态，细胞见纤细的神经末梢走形。(2)Bowman膜:无明显细胞结构，层间大量粗细不均的神经纤维走形（图2）。神经在层间分枝后相互交织，局部可形成网状结构。(3)基质层：基质层细胞边界不清，但细胞核明显，其体积较大，反光较强，可呈棒状、新月状等多种形态。前基质层的细胞核密集，多个核交织围成“网眼”状结构，“网眼”较小，排列紧密（图3）。中、后基质层的细胞核逐渐减少，“网眼”逐渐增大，排列疏松。后基质层细胞核呈散在分布，无明显“网眼”结构（图4）。神经在基质层的发布非常散在，但较Bowman膜要粗大，偶可见其分枝。(4)Descemet膜：很薄，独立的Descemet膜照片很难获得，更多表现为一个移行带，最多见为后基质层的嵌入，也可见其与内皮层相交。三层相互交织移行。
图1上皮细胞 体积小，数量多，边界清晰，排列紧密（略）
图2Bowman膜 无细胞结构，层间见大量神经纤维（略）
图3前基质层 细胞核密集，多个核交织围成“网眼”状结构（略）
图4后基质层 细胞核数量减少，密度降低，“网眼”较大（略）
表1各年龄组各层角膜细胞密度（略）
aP<0.05 vs D组；cP<0.05 vs 前基质层；bP<0.01 vs 基底层
(5)内皮层：较规则的六边形细胞结构，边界清晰，排列规则。细胞透光性较一致，正常状态下细胞核很难观察到。在>60岁的受检眼中，有1眼的内皮细胞中出现小块的无细胞暗区。
2.2角膜细胞密度 对不同年龄段的正常人群的各层角膜细胞，取相同深度的照片进行密度计算，其所取焦平面的误差不超过5μm。每层细胞至少取3张清晰照片，用Rostock操作软件进行细胞计数,所有数据统计用均数±标准差(±s)表示（表1）。结果发现，各年龄段的角膜各层细胞密度，除内皮细胞外，随年龄的增加，细胞都有减少的趋势，但其差异无统计学意义。A组和D组的内皮细胞密度有统计学差异（P<0.05）。在各年龄组间，上皮细胞表层与基底层之间的差异均有统计学意义（P<0.01），前基质层细胞密度与中、后基质层密度之间有统计学差异（P<0.05）。
上一页 [1] [2] [3] 下一页 |
