基础             206                                      PO0092
　
　　ＮＦ-κＢ在TNF-α对人眼小梁细胞MMP-3和MMP-9表达影响中的作用

　　濮清岚 吴瑜瑜

　　泉州  福建医科大学第二临床医学院眼科362000

　　目的 探讨TNF-α对体外培养的人眼小梁细胞（human trabecular cells, HTCs）基质金属蛋白酶（MMP-3、MMP-9）表达的影响、意义及ＮＦ-κＢ的特异抑制剂（PDTC）对其表达的影响。

　　方法  采用RT-PCR法和酶谱分析法(zymography)检测体外培养的HTCs经0.0ng/ml(对照组)、1ng/ml、10ng/ml、25ng/mlTNF-α处理24h后，细胞表达MMP-3、MMP-9的量；运用NF-κB的特异抑制剂二硫氨基甲酸吡啶（Pyrollidine dithocarba-mate, PDTC）抑制NF-κB的活化，观察不同浓度TNF-α对体外培养的HTCsMMP-3，-9表达的影响。

　　结果  （1）利用RT-PCR法检测1ng/ml、10ng/ml、25ng/ml的TNF-α实验组细胞MMP-3/β-actin吸光度比值分别为0.88±0.02，1.02±0.01，1.20±0.02 ，各实验组与对照组0.65±0.01相比，P<0.05均有显著性差异，另10ng/ml、25ng/ml的TNF-α实验组细胞提前30min加入PDTC（100μM），MMP-3/β-actin吸光度比值分别为0.78±0.07，0.87±0.03，分别较未加入PDTC组有显著性差异（P<0.05）；1ng/ml、10ng/ml、25ng/ml的TNF-α实验组细胞MMP-9/β-actin吸光度比值分别为0.94±0.01，0.97±0.05，1.13±0.02，各实验组与对照组0.75±0.02相比，P<0.05均有显著性差异，另10ng/ml、25ng/ml的TNF-α实验组细胞提前30min加入PDTC（100μM），MMP-9/β-actin吸光度比值分别为0.78±0.05，1.02±0.01，分别较未加入PDTC组有显著性差异（P<0.05）。（2）酶谱分析法（zymography）检测1ng/ml、10ng/ml、25ng/ml的TNF-α实验组细胞MMP-3条带酶解量分别为114.55±5.62，216.10±11.21，276.86±17.97，各实验组与对照组94.31±3.69相比，P<0.05均有显著性差异，另10ng/ml、25ng/ml的TNF-α实验组细胞提前30min加入PDTC（100μM），MMP-3条带酶解量分别为99.18±8.19，125.75±5.66，分别较未加入PDTC组有显著性差异（P<0.05）；1ng/ml、10ng/ml、25ng/ml的TNF-α实验组细胞MMP-9条带酶解量分别为443.4±24.46，497.44±19.20，590.53±24.83，各实验组与对照组319.25±32.53相比，P<0.05均有显著性差异，另10ng/ml、25ng/ml的TNF-α实验组细胞提前30min加入PDTC（100μM），MMP-9条带酶解量分别为349.15±24.21，456.62±34.12，分别较未加入PDTC组有显著性差异（P<0.05）。

　　结论  TNF-α可调节MMP-3及MMP-9的表达，TNF-α通过活化ＮＦ-κB启动MMP-3，MMP-9的转录，但除了有ＮＦ-κB参与MMP-3、MMP-9转录的启动外，还有其他转录因子的参与。

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